一、葡萄牙发生猪水疱病(论文文献综述)
何勇君,师清博,刘晨[1](2021)在《猪病跨境传播与防控措施》文中认为随着全球化的进程,人类、货物、运输工具在全球范围内广泛流动,为猪病的跨境传播提供有利条件,给生猪养殖业及公共卫生安全带来持续的威胁。该文主要对目前猪病跨境传播的概况、影响因素、传播途径及防控措施等进行论述,以期为猪病的防控工作提供参考。
王莹[2](2020)在《多种猪源性外来病液相芯片检测方法的建立》文中研究表明猪源性外来病能够通过国际间贸易交流、野生动物携带及昆虫媒介传入我国,一旦传入将会给我国养猪业带来严重的损失,甚至是公共卫生问题。本研究以非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)、尼帕病毒(Nipahvirus,NiV)、水疱性口 炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)、塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SW)以及口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)5 种猪源性病毒为研究对象,设计特异性扩增引物,利用多重PCR扩增得到带有修饰的扩增产物,然后与微球杂交、孵育,并验证方法的敏感性和特异性,以期构建多种猪源性外来病的液相芯片检测体系。主要研究结果如下:1.多种猪源性外来病单重PCR体系的建立建立的ASFV、NiV、VSV、SW和FMDV的单重PCR检测方法,敏感性结果最低检测量分别为 39.0copies/μ L、4.6copies/μ L、29.9copies/μ L、36.8copies/μ L和20.9copies/μ L;特异性结果为每种病毒的单重PCR检测方法只对目的基因特异性扩增,对其余4种对照病原无扩增。2.多种猪源性外来病多重PCR体系的建立在单重PCR的基础上,对多重PCR退火温度进行优化,确定最佳多重PCR反应条件和检测体系。敏感性结果中ASFV、NiV、VSV、SVV和FMDV扩增单一质粒时最低检测量分别为3.90x102copies/μL、4.60x104copies/μL、2.99x104copies/μL、3.68x102copies/μL、2.09x102copies/μL;扩增混合模板时 ASFV最低检测量为 3.90x103copies/μL、SVV 最低检测量为 3.68x104copies/μL、FMDV最低检测量为2.09x103copies/μL,NiV和VSV在凝胶电泳图上不易区分先不做分析。特异性实验结果表明建立的多重PCR检测方法只扩增特异性目的条带。3.多种猪源性外来病液相芯片检测方法的建立将多重PCR扩增产物与微球杂交,再与链霉亲和素藻红蛋白孵育,孵育后利用Luminex 200液相芯片仪检测荧光中位值。对杂交时间、杂交温度进行优化确定最佳杂交条件。所有阳性判定结果的MFI值均≥3倍阴性对照,且阴性对照≤300。ASFV、NiV、VSV、SVV和FMDV的敏感性实验结果中单一质粒液相芯片检测最低检测量分别为 39.0copies/μL、4.60x1 04copies/μL、2.99x103copies/μL、36.8copies/μL和2.09x102copies/μL;混合质粒液相芯片检测最低检测量分别为3.90x102copies/μL、4.60x104copies/μL、2.99x105copies/μL、3.68x103copies/μL 和2.09x102copies/μL。液相芯片检测方法只对研究的五种病毒特异性反应,与其余对照病毒无交叉反应。同批次3组重复实验的变异系数均小于0.2%。本实验成功建立了 ASFV、NiV、VSV、SVV和FMDV五种病毒的液相芯片检测方法,为猪源性病毒病的快速、高通量检测提供技术支持,也为其他病原体液相芯片检测方法的建立提供思路。
王健[3](2018)在《动物疫情公共危机善后处理机制研究》文中研究表明动物疫情公共危机善后处理机制的建设,与十九大工作报告中提到的“统筹传统安全与非传统安全建设”存在密切联系,是危机管理全过程不可缺少的环节。在对国内外研究现状的分析中发现,鲜有在动物疫情公共危机领域进行善后处理机制的研究。本文主要通过文献分析法、文本分析法、向量自回归模型(VAR)和断点回归模型(RDD)等,基于危机生命周期理论、最优风险分散理论以及委托代理理论等理论基础,通过疫情善后处理机制理论分析与实践应用的对比,围绕善后处理中“善后恢复”和“善后重建”两个功能模块对动物疫情公共危机善后处理机制中存在的问题提出改进建议。认为应当在“善后恢复”中,倡导构建“公私合营”的救助补偿机制,发挥第三方权威机构在心理干预机制中的作用,根据生产等具体情况采取合适的生产恢复鼓励措施;在“善后重建”中,建议提升责任追究机制的容错空间,为调查评估机制运行扫清阻碍,鼓励地方数据库的建设,构建数据驱动的避险容灾机制。在善后阶段不仅恢复损失,更尝试通过调查评估和经验反思,进一步提升系统的危机抵抗能力,抵御下一次危机的侵袭。
郭效珍[4](2017)在《PEDV感染Vero细胞的蛋白质组学分析及诱导细胞自噬的机制研究》文中认为近年来,由猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株导致的猪流行性腹泻(PED)大规模暴发,给世界养猪业造成了巨大经济损失,引起各国学者的高度重视。PEDV快速检测及其致病机理的研究就显得尤为重要。本研究首先制备了PEDV单克隆抗体,建立了肠道组织PEDV快速检测方法,为临床PED诊断以及致病机制研究提供基础。开展了以i TRAQ为基础的PEDV强弱毒株感染Vero细胞的比较蛋白质组学分析,获得PEDV强弱毒株感染Vero细胞的差异蛋白表达谱,为解析不同毒力PEDV毒株的致病机制提供参考。在蛋白质组学分析的基础上,探究了细胞自噬在PEDV复制过程中的作用,为新型抗病毒策略的制定提供基础。具体研究内容如下:1.PEDV单克隆抗体的制备及生物学特性分析利用原核表达的PEDV S1D蛋白,制备了3株抗PEDV的单克隆抗体。三株单抗效价均在1:106以上,且均为Ig G 2a亚型κ轻链。IFA和Western Blot试验表明,该抗体可以与杆状病毒表达的S1蛋白发生特异性反应,能够特异性识别PEDV病毒粒子,与另外两种常见肠道病毒TGEV、RV不发生交叉反应。此外,该单抗还可以用于PEDV感染仔猪肠道免疫组织化学分析。2.PEDV快速检测方法的建立在本试验获得单克隆抗体的基础上,借助冰冻切片技术,建立了一种用于临床肠道样品PEDV快速检测的IFA方法。该方法与HE染色分析相结合,不仅可以特异性检测肠道PEDV感染,还可以直观病变部位损伤情况。将102份临床送检仔猪肠道分别进行IFA和RT-PCR检测,两者PEDV检出率分别为97%和92%,总符合率为91.2%,表明该方法可以用于临床PEDV快速检测。3.PEDV强弱毒株感染Vero细胞的蛋白质组学分析本研究运用i TRAQ串联LC-MS/MS技术,开展了PEDV强弱毒株感染Vero细胞的蛋白质组学研究。在PEDV强毒株CH/YNKM-8/2013和CV777样疫苗毒株AH-M感染组分别鉴定到661个和474个差异表达的蛋白。生物信息学分析发现,差异蛋白主要聚焦于蛋白质合成、免疫调控、细胞组装、信号转导以及凋亡等方面。进一步分析发现,较弱毒株而言,PEDV强毒株显着上调NF-κB通路,诱发更强烈的炎症反应。此外,PEDV强毒株通过下调m TOR及其下游靶分子4EBP1和p70S6K,以及e IF2(真核起始因子)通路活性来抑制细胞蛋白质的合成。4.PEDV感染Vero细胞诱导完全细胞自噬PEDV感染Vero细胞蛋白质组学分析发现,多个自噬相关蛋白在PEDV感染过程中显着上调,同时自噬相关通路m TOR显着下调,这提示细胞自噬可能与PEDV在Vero细胞上的增殖有关。透射电子显微镜(TEM)观察发现,PEDV感染的Vero细胞中自噬样双层膜囊泡结构增多。激光共聚焦显微镜分析表明,PEDV感染导致GFP-LC3的点状积累,同时免疫印迹分析发现自噬相关标志蛋白表达量显着增加。这表明PEDV感染可以诱导细胞自噬。UV灭活试验进一步证明细胞自噬的激活与PEDV的有效复制有关。为了探究PEDV感染能否诱导自噬潮,我们检测了p62的降解、m RFP-GFP-LC3的共定位,以及加入溶酶体抑制剂后p62和LC3 II含量的变化,结果表明PEDV感染可以诱导完全细胞自噬。5.细胞自噬促进PEDV增殖为了探究细胞自噬在PEDV增殖过程中的具体作用,我们分别利用自噬抑制剂(3-MA或CQ)和诱导剂(rapamycin)处理Vero细胞,观察PEDV的增殖情况。发现抑制细胞自噬后,PEDV的病毒滴度降低,而诱导细胞自噬后,PEDV病毒滴度升高。将自噬关键基因Beclin1和ATG5沉默之后,PEDV病毒滴度降低。这进一步说明细胞自噬可以促进PEDV增殖。6.细胞自噬与NF-κB信号通路介导的炎症反应存在正调控关系为了探究细胞自噬在PEDV介导炎症反应中的作用,我们发现当自噬关键基因ATG5和Beclin1沉默之后,PEDV诱导的炎性细胞因子表达显着下调。这提示,细胞自噬可能参与PEDV介导的炎症反应。进一步研究发现,当细胞自噬受到抑制时,NF-κB信号通路活性降低。同样地,当NF-κB活性受到抑制时,PEDV诱导LC3 II的含量也显着降低。这表明细胞自噬可能与PEDV诱导的NF-κB信号通路存在正调控关系。为了排除上述过程中PEDV不同增殖滴度对炎性细胞因子表达的影响,我们用TNF-α处理自噬抑制后的Vero细胞,发现TNF-α介导的炎性细胞因子表达量下调。这进一步说明了PEDV感染Vero细胞诱导的细胞自噬与PEDV诱导的炎症反应存在正调控关系。
张永强,吴晓东,王志亮[5](2015)在《非洲猪瘟的流行历史与现状》文中提出非洲猪瘟是严重危害养猪业的一种烈性传染病。20世纪20年代首次发现于非洲的肯尼亚,2000年以前曾传播至伊比利亚半岛和加勒比地区,2007年传入格鲁吉亚并在高加索地区"扎根"。该病主要通过航班或港口废弃物、猪肉及其制品、野猪携带病毒和软蜱携带病毒等方式传播,一旦传入某一地区极易形成完整的繁殖循环链,成为自然疫源地,ASFV的繁殖循环链主要有三种:森林循环、家猪循环以及在森林循环和家猪之间循环。本文对疫情引发的经济损失进行了阐述,分析了发病国防控措施的优点与不足,为科学防控该病提供依据。
李珍[6](2014)在《梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药基因突变位点检测》文中进行了进一步梳理梅毒(syphilis)是一种慢性经典的性传播疾病,梅毒螺旋体(TreponemaPallidum,TP)是引起梅毒的病原体,其可侵犯全身各器官(全身皮肤黏膜、心血管、神经、骨骼等),造成多系统损害,产生多种多样的症状和体征,梅毒也因此被称为“最大模仿者”。对于梅毒的治疗,青霉素是首选的治疗药物,但是在治疗上存在一些问题,如:青霉素过敏反应及肌肉注射引起疼痛和不便等,严重影响了青霉素应用的安全性和患者的依从性。鉴于青霉素治疗的局限性,人们一直在寻找既具有较好疗效,又方便服用的治疗药物。大环内酯类抗生素如阿奇霉素是近年来备受关注的药物,对梅毒螺旋体有杀伤活性,治疗早期及潜伏期梅毒有效,在组织中的半衰期较长,只需单剂量口服,并且可同时治疗其他性传播疾病(STD),因此大环内酯类抗生素被用于梅毒的预防及治疗。但近年来研究发现,梅毒螺旋体对大环内酯类抗生素出现了耐药,耐药基因定位于TP23SrRNA基因的2058或2059位由A突变为G(A2058G,A2059G)。之后多个国家和地区进行了大环内酯类抗生素耐药基因突变位点的检测,耐药率各不相同。迄今为止,山东地区未有梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药突变位点检测的报道,因此本研究收集66例梅毒螺旋体DNA标本进行TP23SrRNA基因突变位点检测。实验目的:1.检测山东地区TP菌株是否存在大环内酯类抗生素耐药基因(23SrRNA)突变位点;2.统计山东地区TP大环内酯类抗生素耐药率;3.评估山东地区大环内酯类抗生素能否作为治疗梅毒的替代药物实验方法:收集疑似梅毒患者肛门及生殖器溃疡标本,提取TP DNA,经实时荧光定量PCR证实为梅毒螺旋体,然后进行23SrRNA基因目的片段的扩增,对PCR扩增产物进行纯化并直接目的片段测序进行序列分析,检测突变位点。实验结果:本研究发现梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药基因23SrRNA基因上的两个突变位点,且66份标本均含有突变位点(100%),61份标本测序含有A2058G突变,5份标本测序含有A2059G突变,其中A2059G为国内首次报道。结论:首先,梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药率在山东地区较高,因此大环内酯类抗生素不推荐作为梅毒治疗的替代药物。其次,两耐药突变位点的报道(A2059G在国内首次报道),表明了耐药菌株地理分布及菌株的多样性。
翁善钢[7](2013)在《欧洲地区猪病流行情况及养猪业现状》文中研究表明一、欧洲猪病流行情况总体而言,欧洲地区猪病的总体形势同世界其他地区相似。不过,有些国家存在其他国家没有的某种特定疾病问题。例如,英国官方的记录仅在2007年12月报道了一起卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii)感染该国育成猪的病例。而该寄生虫感染已在丹麦等其他国家存在了好多年。与此类似的是,英国的猪群中存在针对脑心肌炎病毒(EMCV)的抗体,有些年份的检测显示存在该抗体的猪占20%以上。然而迄今尚无同该病毒有关的临床疾病出现。
翁善钢[8](2013)在《欧洲猪病流行情况及养猪业现状》文中指出1猪病流行情况总体而言,欧洲地区猪病的形势同世界其他地区相似。不过有些国家存在其他国家没有的某种特定疾病问题。例如,据英国官方记载,2007年12月卡氏肺孢子虫感染该国育成猪。而该种寄生虫感染已在丹麦等其他国家存在了好多年。与此类似的是,英国的猪群中存在针对脑心肌炎病毒(EMCV)的抗体,有些年份的检测显示存在该抗体的猪占20%以上。然而迄今为止尚无同该病毒有关的临床疾病出现。
李凯年,孟丹,孟昱[9](2010)在《猪水疱病的临床意义、防控进展与趋势》文中提出猪水疱病(Swinevesiculardisease,SVD)又被称为猪传染性水疱病,是猪的一种急性、热性、接触性传染病,由小RNA病毒科(Picornavividae)肠道病毒属(Enterovirus)的猪水疱病病毒(SVDV)感染所致,以鼻部、口腔黏膜、蹄部和母猪乳头周围发生水疱性损伤为主要特征。由于猪水疱病常以流行的形式发病,发病率高,在临床上又很难与口蹄疫等水疱性疾病区分,对养猪业以及活猪、猪肉及其产品国际贸易和猪的动物福利产生较大的影响。
夏生林,刘岐名,张丹俊[10](2009)在《猪水疱病的诊断与防制措施》文中指出猪水疱病是猪的一种急性病毒性传染病,其临床表现主要为蹄部和口、鼻等出现水疱或溃烂为特征。猪水疱病的流行对畜牧业生产和国际经济贸易构成严重威胁,对该病的准确诊断和防治极其重要。主要从病原、流行病学、临床症状、防制措施等方面对SVD进行了较全面的阐述,以期为科学防制提供参考。
二、葡萄牙发生猪水疱病(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、葡萄牙发生猪水疱病(论文提纲范文)
(1)猪病跨境传播与防控措施(论文提纲范文)
0 引言 |
1 猪病跨境传播概况 |
2 影响因素 |
2.1 动物活动与迁徙 |
2.2 贸易、旅游因素 |
2.3 其他因素 |
3 跨境传播途径 |
3.1 生猪运输 |
3.2 猪肉及肉制品造成的传播 |
3.3 经污染物引起的传播 |
4 防控措施 |
5 结束语 |
(2)多种猪源性外来病液相芯片检测方法的建立(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 引言 |
1.1 五种猪病及病毒概况 |
1.1.1 非洲猪瘟 |
1.1.2 尼帕病毒病 |
1.1.3 水疱性口炎 |
1.1.4 塞尼卡谷病毒病 |
1.1.5 口蹄疫 |
1.2 液相芯片 |
1.2.1 液相芯片原理 |
1.2.2 液相芯片技术的特点 |
1.3 液相芯片技术的应用 |
1.3.1 猪病方面应用 |
1.3.2 禽病方面应用 |
1.3.3 反刍动物疫病方面 |
1.3.4 实验动物疫病方面 |
1.3.5 人兽共患病方面 |
1.4 研究目的与意义 |
2 多种猪源性外来病病毒单一PCR检测方法的初步建立 |
2.1 实验材料及设备 |
2.1.1 实验材料 |
2.1.2 实验仪器设备 |
2.1.3 病毒和毒株 |
2.1.4 培养基及相关的制备 |
2.1.5 引物的设计、合成与筛选 |
2.1.6 疫苗核酸的提取及反转录 |
2.2 方法 |
2.2.1 构建质粒 |
2.2.1.1 重组质粒的转化 |
2.2.1.2 重组质粒的提取 |
2.2.1.3 重组质粒浓度的测定及拷贝数换算 |
2.2.2 引物的筛选及单重PCR体系的建立 |
2.2.3 单重PCR反应敏感性实验 |
2.2.4 单重PCR反应特异性实验 |
2.3 结果 |
2.3.1 拷贝数计算 |
2.3.2 引物的初步筛选 |
2.3.3 单重PCR反应灵敏性结果 |
2.3.4 单重PCR反应特异性结果 |
2.4 小结与讨论 |
3 多种猪源性外来病病毒多重PCR检测方法的建立 |
3.1 多重PCR检测体系的建立 |
3.1.1 多重PCR退火温度的优化 |
3.1.2 多重PCR方法敏感性实验 |
3.1.3 多重PCR方法特异性实验 |
3.1.4 多重PCR方法重复性实验 |
3.2 结果 |
3.2.1 多重PCR退火温度的优化 |
3.2.2 多重PCR方法的灵敏性实验结果 |
3.2.3 多重PCR方法的特异性实验结果 |
3.2.4 多重PCR方法的稳定性实验结果 |
3.3 小结与讨论 |
4 多种猪源性外来病液相芯片检测方法的建立 |
4.1 实验材料及设备 |
4.1.1 实验材料 |
4.1.2 实验仪器及设备 |
4.1.3 病毒与毒株 |
4.1.4 TAG的选择与修饰引物合成 |
4.2 方法 |
4.2.1 微球杂交缓冲液的制备及体系建立 |
4.2.1.1 微球工作液的制备 |
4.2.1.2 SAPE报告液的制备 |
4.2.1.3 微球杂交体系的建立 |
4.2.2 Luminex 200~(TM)液相芯片检测平台初始化 |
4.2.3 PCR产物与微球杂交 |
4.2.4 液相芯片杂交结果的判定 |
4.2.5 液相芯片杂交条件的优化 |
4.2.5.1 液相芯片杂交时间的优化 |
4.2.5.2 液相芯片杂交温度的优化 |
4.2.6 液相芯片检测方法敏感性实验 |
4.2.7 液相芯片检测方法特异性实验 |
4.2.8 液相芯片检测方法稳定性实验 |
4.2.9 临床样品检测 |
4.3 结果 |
4.3.1 液相芯片杂交时间优化实验结果 |
4.3.2 液相芯片杂交温度优化实验结果 |
4.3.3 液相芯片敏感性实验结果 |
4.3.4 液相芯片特异性实验结果 |
4.3.5 液相芯片稳定性实验结果 |
4.3.6 临床样品检测 |
4.4 小结与讨论 |
5 结论 |
致谢 |
参考文献 |
作者简介 |
(3)动物疫情公共危机善后处理机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 前言 |
1.1 研究背景 |
1.2 研究目的与意义 |
1.3 研究现状 |
1.3.1 国外研究现状 |
1.3.2 国内研究现状 |
1.4 研究内容、方法与创新点 |
1.4.1 研究内容 |
1.4.2 研究方法 |
1.4.3 可能的创新点和难点 |
第2章 相关概念及理论基础 |
2.1 研究概念 |
2.1.1 动物疫情公共危机 |
2.1.2 危机善后处理机制 |
2.2 理论依据 |
2.2.1 生命周期理论 |
2.2.2 最优风险分散理论 |
2.2.3 委托代理理论 |
第3章 动物疫情公共危机善后处理机制现状分析 |
3.1 我国动物疫情公共危机管理体系结构 |
3.2 动物疫情公共危机善后处理相关政策法规情况 |
3.3 动物疫情公共危机善后处理机制 |
第4章 动物疫情公共危机“善后恢复” |
4.1 救助补偿主体单一、平均标准缺口较大 |
4.1.1 动物疫情公共危机救助补偿机制现状 |
4.1.2 国外疫情损失分担机制 |
4.1.3 中国动物疫情损失分担机制设计 |
4.1.4 扑杀补偿机制政策建议 |
4.2 心理干预方式单调、生产恢复情况复杂 |
4.2.1 心理干预机制作用原理分析 |
4.2.2 心理干预与恢复生产实证分析设计 |
4.2.3 动物产品价格随机冲击效应模型构建 |
4.2.4 动物产品价格随机冲击效应分析 |
4.2.5 心理干预与恢复生产分析总结 |
第5章 动物疫情公共危机“善后重建” |
5.1 责任追究容错不及与调查评估受阻 |
5.1.1 责任与调查评估机制理论分析 |
5.1.2 责任追究与调查评估实证设计 |
5.1.3 责任与调查评估机制实证分析总结 |
5.2 避险容灾建设不完备 |
5.2.1 避险容灾机制的定义与内涵 |
5.2.2 动物疫情善后处置避险容灾机制建设情况 |
5.2.3 我国动物疫情避险容灾机制建设思路 |
第6章 动物疫情公共危机善后处理机制建设 |
6.1 疫情善后恢复功能的建设 |
6.1.1 建立公私合营的动物疫情扑杀补偿制度 |
6.1.2 建立第三方权威机构主导的心理干预机制 |
6.1.3 采取有针对性的恢复生产措施 |
6.2 疫情善后重建功能的建设 |
6.2.1 赋予责任追究容错空间 |
6.2.2 构建数据驱动、保障充足的避险容机制 |
第7章 结论和展望 |
7.1 主要结论 |
7.2 研究展望 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(4)PEDV感染Vero细胞的蛋白质组学分析及诱导细胞自噬的机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略语表(Abbreviation) |
第1章 文献综述 |
1.1 猪流行性腹泻概述 |
1.1.1 PED的临床症状、致病机理及病理变化 |
1.1.2 PED流行病学特点 |
1.1.3 PED流行情况 |
1.1.4 PEDV病原学特征 |
1.1.5 PEDV基因结构 |
1.1.6 PEDV的基因功能研究进展 |
1.1.7 PED诊断 |
1.1.8 PED的疫苗研究及防控进展 |
1.2 单克隆抗体研究进展及应用 |
1.2.1 单克隆抗体概述 |
1.2.2 单克隆抗体在猪病中的研究进展及应用 |
1.2.3 单克隆抗体在PEDV中的研究进展及应用 |
1.3 蛋白质组学技术研究及其应用 |
1.3.1 蛋白质组学概述 |
1.3.2 蛋白质组学在病毒学研究中的应用 |
1.3.3 同位素标记相对与绝对定量(iTRAQ)技术 |
1.4 细胞自噬研究进展 |
1.4.1 细胞自噬概述 |
1.4.2 细胞自噬的分类 |
1.4.3 细胞自噬的分子机制 |
1.4.4 细胞自噬常用研究手段 |
1.4.5 细胞自噬与病毒感染 |
1.4.6 细胞自噬与炎症反应 |
1.4.7 细胞自噬与内质网应激 |
1.4.8 细胞自噬与细胞凋亡 |
1.5 立题依据 |
第2章 PEDV单克隆抗体的制备及应用 |
2.1 研究目的及意义 |
2.2 试验材料 |
2.2.1 细胞、毒株、菌株 |
2.2.2 实验动物 |
2.2.3 载体与质粒 |
2.2.4 主要仪器与试剂 |
2.2.5 相关试剂及其配制 |
2.3 试验方法 |
2.3.1 重组蛋白的表达及纯化 |
2.3.2 单克隆抗体的制备流程 |
2.3.3 间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性克隆 |
2.3.4 阳性杂交瘤细胞的克隆(有限稀释法) |
2.3.5 单克隆抗体的大量制备 |
2.3.6 单克隆抗体的间接免疫荧光(IFA)验证 |
2.3.7 SDS-PAGE和Western Blot检测 |
2.3.8 单克隆抗体的纯化 |
2.3.9 抗PEDV-S1D单克隆抗体特异性检测 |
2.3.10 单克隆抗体分型的鉴定 |
2.3.11 仔猪肠道免疫组织化学分析(SABC 染色法) |
2.3.12 IFA快速检测方法的建立 |
2.4 结果与分析 |
2.4.1 PEDV S1D蛋白的纯化及鉴定 |
2.4.2 PEDV S1D单克隆抗体的制备及初步验证 |
2.4.3 单克隆抗体的纯化及特性分析 |
2.4.4 基于单克隆抗体的PEDV快速诊断方法的初步建立及应用 |
2.5 讨论 |
2.6 小结 |
第3章 PEDV强弱毒株感染Vero细胞的蛋白质组学分析 |
3.1 研究目的及意义 |
3.2 试验材料 |
3.2.1 细胞、毒株 |
3.2.2 主要试剂与试剂盒 |
3.2.3 主要培养基及溶液的配制 |
3.2.4 主要缓冲液及相关试剂的配制 |
3.2.5 主要实验器材 |
3.2.6 分子生物学信息软件 |
3.3 试验方法 |
3.3.1 PEDV的增殖 |
3.3.2 病毒滴度测定 |
3.3.3 病毒RNA的提取及实时绝对荧光定量PCR |
3.3.4 间接免疫荧光实验 |
3.3.5 用于蛋白质组学分析的细胞样品的制备 |
3.3.6 细胞总蛋白的提取及定量 |
3.3.7 FASP方法酶解 |
3.3.8 iTRAQ试剂标记 |
3.3.9 第一维高PH-RP液相分离 |
3.3.10 第二维反相液质联用RPLC-MS |
3.3.11 生物信息学分析 |
3.3.12 细胞总RNA的提取及实时相对定量PCR |
3.3.13 Western Blot试验 |
3.3.14 统计学分析 |
3.4 结果与分析 |
3.4.1 PEDV强弱毒株同源分析及在Vero细胞上增殖的动力学分析 |
3.4.2 蛋白质的鉴定 |
3.4.3 样品间重复性分析 |
3.4.4 蛋白质的定量及差异蛋白的筛选 |
3.4.5 差异蛋白的GO分类 |
3.4.6 差异蛋白的功能性特征分析 |
3.4.7 差异蛋白互作网络分析 |
3.4.8 差异蛋白的验证 |
3.4.9 PEDV感染导致翻译调控水平和炎症反应相关通路失调 |
3.5 讨论 |
3.5.1 宿主蛋白质的合成 |
3.5.2 细胞免疫反应 |
3.5.3 GTPase家族和细胞维持 |
3.5.4 其它差异蛋白 |
3.6 小结 |
第4章 PEDV感染Vero细胞诱导细胞自噬的机制研究 |
4.1 研究目的及意义 |
4.2 试验材料 |
4.2.1 细胞、毒株、菌株 |
4.2.2 载体与质粒 |
4.2.3 抗体、siRNA及主要化学试剂 |
4.2.4 培养基与主要缓冲液的配制 |
4.2.5 主要实验仪器及设备 |
4.3 试验方法 |
4.3.1 PEDV增殖实验 |
4.3.2 细胞活力的测定(MTT法) |
4.3.3 病毒感染 |
4.3.4 Western Blot试验 |
4.3.5 重组质粒无内毒素提取 |
4.3.6 质粒DNA浓度的测定 |
4.3.7 siRNA及质粒转染 |
4.3.8 间接免疫荧光试验与激光共聚焦显微镜观察 |
4.3.9 透射电镜 |
4.3.10 实时荧光定量PCR实验 |
4.3.11 统计学分析 |
4.4 结果与分析 |
4.4.1 自噬调节药物的细胞毒性分析 |
4.4.2 PEDV感染Vero细胞诱导自噬体的形成 |
4.4.3 PEDV感染Vero细胞上调自噬相关蛋白的表达 |
4.4.4 PEDV感染Vero细胞诱导自噬潮 |
4.4.5 抑制细胞自噬降低PEDV的增殖 |
4.4.6 降低自噬关键基因的表达抑制PEDV增殖 |
4.4.7 细胞自噬与PEDV介导炎症反应的关系 |
4.5 讨论 |
4.6 小结 |
第5章 全文总结 |
参考文献 |
附表 |
基本信息 |
致谢 |
(5)非洲猪瘟的流行历史与现状(论文提纲范文)
1传播和循环模式 |
1.1森林循环 |
1.2家猪循环 |
1.3森林循环和家猪之间的传播 |
2非洲猪瘟流行情况 |
2.1历史流行概况 |
2.2非洲地区流行现状 |
2.3高加索及东欧地区流行现状 |
3经济损失 |
4流行趋势 |
5我国监控状况与思考 |
5.1我国ASF监控状况 |
5.2未来的防止传入措施 |
5.3经验和存在问题 |
(6)梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药基因突变位点检测(论文提纲范文)
导师简介 |
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略词表 |
第一章 前言 |
第二章 实验材料与方法 |
2.1 研究对象 |
2.2 实验试剂 |
2.3 实验相关器材 |
2.4 分析软件 |
2.5 实验方法 |
第三章 结果 |
3.1 病例资料(66 例梅毒患者) |
3.2 PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳检测结果 |
3.3 测序结果 |
第四章 讨论 |
第五章 结论 |
参考文献 |
附录 |
综述 |
参考文献 |
攻读学位期间发表的学术论文 |
在校期间所获奖励 |
致谢 |
(7)欧洲地区猪病流行情况及养猪业现状(论文提纲范文)
一、欧洲猪病流行情况 |
1. 病毒。 |
2. 支原体和细菌。 |
二、欧洲养猪业与猪肉生产情况 |
1. 欧洲养猪数量。 |
2. 猪肉产量。 |
3. 未来几年欧洲养猪数量或继续减少。 |
(8)欧洲猪病流行情况及养猪业现状(论文提纲范文)
1 猪病流行情况 |
1.1 病毒 |
1.2 细菌 |
2 养猪与猪肉生产情况 |
2.1 养猪数量 |
2.2 猪肉产量 |
(9)猪水疱病的临床意义、防控进展与趋势(论文提纲范文)
1 猪水疱病的临床意义 |
2 猪水疱病的的防控进展 |
2.1 检测技术取得进步 |
2.2 疫苗研制取得突破 |
3 猪水疱病的防控趋势 |
(10)猪水疱病的诊断与防制措施(论文提纲范文)
1 病原 |
2 流行病学 |
2.1 传染源 |
2.2 易感动物 |
2.3 传播途径 |
2.4 流行特点 |
3 临床症状 |
3.1 经典型 |
3.2 亚临床型 |
3.3 隐性型 (温和型) |
4 病理变化 |
4.1 病理剖检变化 |
4.2 病理组织学变化 |
5 诊断 |
5.1 诊断要点 |
5.2 实验室诊断 |
5.2.1 小鼠接种试验: |
5.2.2 耐酸试验: |
5.2.3 血清学检验: |
5.2.3.1 免疫荧光技术 (immunofluorescence technique) : |
5.2.3.2 补体结合试验 (complement fixation tyest, CFT) : |
5.2.3.3 间接血凝试验 (indirect hemagglutination test, IHA) : |
5.2.3.4 酶联免疫吸附试验 (enzyme-linked immunosorbentassay, ELISA) : |
5.2.4 RT-PCR技术: |
5.3 类症鉴别 |
5.3.1 猪口蹄疫: |
5.3.2 猪水疱性疹: |
5.3.3 猪水疱性口炎: |
5.3.4 猪痘: |
6 防制措施 |
6.1 接种疫苗 |
6.2 严格消毒 |
6.3 加强管理 |
四、葡萄牙发生猪水疱病(论文参考文献)
- [1]猪病跨境传播与防控措施[J]. 何勇君,师清博,刘晨. 畜牧兽医科学(电子版), 2021(15)
- [2]多种猪源性外来病液相芯片检测方法的建立[D]. 王莹. 内蒙古农业大学, 2020(02)
- [3]动物疫情公共危机善后处理机制研究[D]. 王健. 湖南农业大学, 2018(09)
- [4]PEDV感染Vero细胞的蛋白质组学分析及诱导细胞自噬的机制研究[D]. 郭效珍. 华中农业大学, 2017(01)
- [5]非洲猪瘟的流行历史与现状[J]. 张永强,吴晓东,王志亮. 中国动物检疫, 2015(09)
- [6]梅毒螺旋体大环内酯类抗生素耐药基因突变位点检测[D]. 李珍. 济南大学, 2014(01)
- [7]欧洲地区猪病流行情况及养猪业现状[J]. 翁善钢. 中国畜牧业, 2013(09)
- [8]欧洲猪病流行情况及养猪业现状[J]. 翁善钢. 猪业科学, 2013(04)
- [9]猪水疱病的临床意义、防控进展与趋势[J]. 李凯年,孟丹,孟昱. 猪业科学, 2010(04)
- [10]猪水疱病的诊断与防制措施[J]. 夏生林,刘岐名,张丹俊. 畜牧与饲料科学, 2009(Z1)