一、开肺化痰解毒法对人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响（论文文献综述）
王怡恬[1]（2019）在《基于MAPKs信号通路研究黄芩苷对脂多糖所致HBE16细胞粘液高分泌的干预机制》文中研究表明研究目的:基于MAPKs信号通路,研究黄芩苷对脂多糖所致HBE16细胞粘液高分泌的干预机制。研究方法:利用CCK-8（Cell counting kit-8）法探索LPS（Lipopolysaccharides,LPS）刺激HBE16细胞构建体外粘液高分泌模型最佳干预时间和干预浓度,并探索系列浓度（0.01μg/ml-1000μg/ml）黄芩苷对HBE16细胞的最大干预浓度。根据黄芩苷最大干预浓度选择合适的处理浓度并进行干预分组,主要分组为对照组、LPS组、黄芩苷干预组（黄芩苷3个不同浓度10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml）;利用ELISA（Enzyme Linked Immuno-sorbent Assay）法检测细胞培养上清液中MUC5ac的表达水平;RT-PCR（Reverse transcription-polymerase chain reaction）法检测细胞RNA中MUC5ac mRNA表达水平;Western Blotting法检测MAPKs（Mitogen-activated protein kinases）信号通路关键蛋白phospho-Erk（Extracellular regulated protein kinases）、phospho-p38、phospho-JNK（c-Jun N-terminal kinase）的表达水平。研究结果:ELISA法检测MUC5ac表达水平结果示:与对照组相比,LPS组中MUC5ac蛋白水平升高（P<0.05）;与LPS组相比,除6小时时点外（P>0.05）黄芩苷干预组中MUC5ac蛋白水平降低（P<0.05）,其中在24、48小时差异最为明显（P<0.01）;在同一观察时点,除6小时时点外,黄芩苷对MUC5ac的分泌抑制呈现剂量依赖关系。RT-PCR法测定MUC5ac mRNA表达结果示:与对照组比较,除6小时时点外,LPS组MUC5ac mRNA的表达水平明显升高（P<0.01）;与LPS组比较,黄芩苷干预组MUC5ac mRNA的表达水平明显下降（P<0.01）;并且在12、24、48小时观察时点,黄芩苷干预组MUC5ac mRNA的表达水平呈现剂量依赖的特点,尤以24小时明显。Western Blotting法测定MAPK关键蛋白的表达结果示:与对照组相比较,LPS组phospho-Erk、phosphop38、phospho-JNK蛋白表达明显增加（P<0.01）;与LPS组比较,黄芩苷干预组phospho-Erk、phospho-p38、phospho-JNK蛋白表达均降低（P<0.05）,尤以黄芩苷50μg/ml、100μg/ml组结果明显。研究结论:黄芩苷可以通过调控MAPK信号通路中phospho-Erk、phospho-p38、phospho-JNK的表达,抑制LPS所致的人气道上皮细胞中MUC5ac mRNA的表达和MUC5ac的分泌,从而发挥抑制细胞粘液高分泌作用。
胡婵婵[2]（2017）在《清肺口服液对RSV感染小鼠Treg/Th17及IL-2和IL-17水平的影响》文中进行了进一步梳理目的:探讨清肺口服液对感染RSV小鼠的Treg/Th17细胞平衡的影响及对相关因子IL-2和IL-17表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将BABL/c小鼠共50只按随机数字表分为空白组、模型组、清肺高剂量组（4g·mL-1）、清肺低剂量组（1.33g·mL-1）、利巴韦林组,每组各10只。用RSV（Long株）滴鼻48h后,按1ml/kg的量给予空白组和模型组0.9%生理盐水灌胃;利巴韦林组、清肺低剂量组及清肺高剂量组分别予利巴韦林0.0025g/mL,清肺口服液1.33 g/mL和4 g/mL灌胃给药,24h后将小鼠处死,立即取小鼠的肺组织进行病理分析,使用ELISA方法检测肺泡灌洗液（BALF）中IL-2、IL-17的水平,流式细胞术方法测定小鼠脾脏细胞中Treg、Th17细胞的表达含量,并分析Treg/Th17细胞水平的变化。结果:病理分析结果表明,同空白组相比较,模型组肺组织病理评分增高（P<0.01）;与模型组比较,利巴韦林组、清肺高剂量组的肺组织病理评分下降（P<0.05）。Treg/Th17及相关细胞因子检测显示,与空白组相比,模型组的Treg/Thl7及IL-2的水平下降（p<0.01）,IL-17的水平升高（p<0.01）;与模型组相比,各给药组的Treg/Thl7升高（p<0.05）,IL-2水平升高（p<0.01）,IL-17的水平下降（p<0.01）;同利巴韦林组相比,清肺口服液组IL-2水平升高（p<0.01）,清肺高剂量组的Treg/Thl7升高（p<0.05）,IL-17的水平下降（p<0.01）,清肺低剂量组Treg/Thl7下降（p<0.01）,IL-17的水平升高（p<0.01）。结论:清肺口服液可以调节Treg/TH17细胞的平衡,并上调RSV感染小鼠IL-2的表达水平及下调IL-17的水平,从而发挥其抗RSV的作用。
万磊[3]（2013）在《基于TGF-β1/Smads和ERK通路cross-talk研究新风胶囊改善AA大鼠肺功能的机理》文中进行了进一步梳理1目的在中医“肺脾相关”理论指导下，以“肺痹”为切入点，分析、总结类风湿关节炎（RA）肺功能损伤的中医学病机，从动物实验角度系统观察佐剂关节炎（AA）大鼠足跖肿胀度、关节炎指数（AI）动态变化和肺功能变化特点，检测AA大鼠滑膜、肺组织TGF-β1/Smads、ERK信号通路及细胞因子变化，评价中药新风胶囊（XFC）对其影响，探讨XFC改善AA大鼠肺功能的作用机制。2方法2.1理论研究系统搜集和整理RA肺病变相关文献，筛选和总结引起RA肺病变发病机制的国内外研究现状，评价和分析转化生长因子β1（TGF-β1）诱导Smads、 ERK通路激活途径，从理论角度研究RA肺功能降低与TGF-β1/Smads、ERK信号通路cross-talk的关系。依从中医基础理论阐述中医“肺”与“脾”之间关系，从生理病理及病因病机角度探讨“肺脾”的联系，探寻健脾化湿通络法治疗RA肺功能降低的机制。2.2实验研究将大鼠随机分为正常对照（NC）组，模型对照（MC）组，甲氨喋呤（MTX）组，雷公藤多苷片（TPT）组和XFC组，每组10只。除NC组外，其余大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂（CFA）0.1ml致炎造模，第15d在尾根部注射CFA0.05ml加强免疫，第19d给药。各组的给药量如下：XFC组0.034g/1ml/100g，TPT组0.57mg/1ml/100g，MTX组0.095mg/1ml/100g，NC、MC组予生理盐水9mg/1ml/100g；XFC、TPT、NC、MC组一天一次，MTX组一周一次，各组连续用药30d。观察各组大鼠体质量、足跖肿胀度、关节炎指数（AI）和肺功能变化，光镜、电镜观察滑膜、肺组织形态学变化，酶联免疫吸附法检测细胞因子TGF-β1、白介素（IL）-1β、IL-4、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、结缔组织生长因子（CTGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）表达，PCR、免疫组化、免疫印迹法检测滑膜、肺组织Smads/ERK通路的变化。3结果3.1理论研究结果3.1.1TGF-β1/Smads通路的激活促使RA肺功能降低：TGF-β1首先与其受体TβRⅡ、TβRI结合形成三聚体复合物，进一步磷酸化Smad2/3，p-Smad2/3与TβRI受体分离，即与Smad4结合形成复合体，携带信号从胞浆进入胞核激活转录，促进肺病变；而Smads7是抑制分子，Smad7抑制能力降低，不能抑制Smads信号的转录，失去对RA肺部病变的抑制作用，导致肺功能降低。3.1.2ERK信号通路诱导RA肺功能降低：ERK通路激活后可介导细胞生长、分化、增殖，促进成纤维细胞分泌和细胞外基质（ECM）在肺间质和肺泡中过度积聚，使得肺泡距离增加形成间质肺，肺毛细血管床和血流量的减少，血液流变学改变，出现肺弥散功能降低，氧和二氧化碳的交换作用减弱，同时ERK通路激活能调节炎症相关基因表达增加，导致肺功能降低。3.1.3Smads和ERK通路cross-talk是RA肺功能下降的重要因素：TGF-β1/Smad信号通路的激活过程也受ERK通路的调控，Smad2/3含有ERK磷酸化的位点，可被ERK磷酸化，促进p-Smad2/3与Smad4的结合并转录。同时，ERK通路受Smads通路调控，Smad4可调控ERK通路相关细胞因子或激酶的转录，从而激活ERK信号传导通路，Smads和ERK通路cross-talk共同导致肺功能降低。3.1.4“脾虚”是RA肺功能降低的发病基础：脾虚致气血亏虚，脾土不能生养肺金，日久导致肺气失养，肺宣肃功能失调，出现咳嗽、自汗、气短等；脾虚运化功能失常，水液停滞，湿停中焦，痰湿内生，聚而生痰成饮，上干于肺，肺失治节，可见痰多，胸满憋闷，喉中痰鸣有声、胸背痛，迁延不愈，甚而喘促；脾虚致痰瘀互结，肺络阻滞，多见肺纹理紊乱、结节、间质纤维增生等。3.1.5“健脾化湿通络法”能改善RA肺功能水平：根据RA肺功能降低的中医病机呈现“脾胃虚弱、气血不足、湿浊内生、痰瘀互结”和“虚实夹杂”的特点，临床上拟用“扶正祛邪”治则，采用“健脾化湿通络”治法，应用XFC治疗RA及肺功能损伤，取得了良好效果，XFC通过改善关节和全身症状体征，从而进一步改善肺部症状体征，提高弥散功能和通气功能。3.2实验研究结果3.2.1AA大鼠肺功能变化及XFC对其影响与NC组比较，MC组大鼠肺功能FEV1、FEF50、FEF75、MMF、PEF降低（P <0.01）。与MC组比较，XFC组FEV1、FEF50、FEF75、MMF、PEF升高（P<0.05或P <0.01）。与MTX组比较，XFC组FEF50、FEF75、MMF升高（P <0.05）；与TPT组比较，XFC组肺功能参数FEF75、MMF升高（P <0.05或P <0.01）。3.2.2AA大鼠足趾肿胀度、AI、体质量变化及XFC对其影响相关分析显示：AA大鼠肺功能FEF75与足跖肿胀度呈负相关，FEF50、FEF75与AI呈负相关（P <0.01或P <0.05）。给药前1d，与NC组相比，MC组大鼠体质量降低，足跖肿胀度、AI显着升高（P <0.01）。给药后30d，与NC组比较，MC组大鼠足趾肿胀度、AI升高；与MC组比较，各治疗组大鼠足跖肿胀度、AI降低；与MTX组比较，XFC组足趾肿胀度差值降低（P <0.01或P <0.05）。3.2.3AA大鼠关节形态学变化及XFC对其影响光镜观察：与NC组比较，MC组大鼠滑膜及其附属组织可见大量炎性细胞浸润，血管增多，滑膜分层增多，呈绒毛状突起嵌入关节腔内，关节软骨表面剥脱或缺如。电镜观察：MC组滑膜细胞变形，线粒体肿胀，粗面内质网减少、破坏，核膜不完整，染色质分布不均，嵴突排列不规整或部分消失；XFC治疗后，大鼠滑膜可见少量中性粒细胞等炎细胞浸润，部分滑膜嵌入关节腔内，关节面较规整；滑膜细胞线粒体少量变形、肿胀，核膜边界较清楚，染色质较均匀，大部分嵴突排列完整。与MTX组比较，XFC组滑膜细胞线粒体肿胀减轻；XFC组TPT组比较无明显差异。3.2.4AA大鼠肺组织形态学变化及XFC对其影响光镜观察显示：与NC组比较，MC组大鼠肺泡结构不规整，肺泡腔萎缩或消失，部分呈肺实质性改变，肺间隔增宽，间质中可见大量炎细胞浸润，肺泡上皮细胞增生；电镜观察Ⅱ型肺泡上皮细胞数量减少，胞膜结构不完整，线粒体肿胀、变性，板层小体减少呈排空状态，肺间质内成纤维细胞增生。XFC治疗组大鼠肺泡结构较规整，部分肺泡腔萎缩、变形，间质中可见少量中性粒细胞等炎细胞浸润；Ⅱ型肺泡上皮细胞结构基本完整，粗面内质网较丰富，线粒体大部分完好，偶见板层小体排空现象；与MTX组比较，XFC组肺组织炎细胞浸润和肺泡上皮细胞减少；与TPT组比较无显着差异。3.2.5AA大鼠血清细胞因子的变化及XFC对其影响相关分析显示：AA大鼠肺功能FEV1、FEF75与IL-1β、IL-4呈负相关，FEF25、FEF50、FEF75、MMF与TGF-β1、CTGF、FGF呈负相关；PEF与IL-10呈正相关，FEV1、FEF50与Th1/Th2呈正相关，FEF50、FEF75与IFN-γ呈正相关（P <0.01或P <0.05）。与NC组比较，MC组血清细胞因子IL-1β、IL-4、TGF-β1、CTGF升高，IFN-γ、IL-10、Th1/Th2细胞、FGF降低（P <0.01或P <0.05）。与MC组比较，XFC组IL-1β、IL-4、TGF-β1、CTGF降低，IFN-γ、IL-10、Th1/Th2、FGF表达升高（P <0.01或P <0.05）。与MTX组比较，XFC组CTGF降低，IFN-γ、IL-10、Th1/Th2表达量升高（P <0.05）；与TPT组比较，XFC组TGF-β1降低（P <0.05）。3.2.6AA大鼠滑膜、肺组织Smads通路变化及XFC对其影响相关分析显示：AA大鼠肺功能FEV1与TGF-β1mRNA、蛋白呈负相关，FEF25与Smad4蛋白呈负相关，FEF50与TβRⅡ蛋白表达呈负相关，FEF75与TGF-β1、Smad3mRNA、p-Smad2/3蛋白呈负相关，PEF与TGF-β1蛋白呈负相关（P <0.05）；FEF50、MMF与Smad7mRNA呈正相关（P<0.05）。与NC组比较，MC组大鼠滑膜、肺组织TGF-β1、Smad2/3/4mRNA和TGF-β1、TβRI、TβRⅡ、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad4蛋白表达升高，Smad7mRNA、蛋白表达降低（P <0.01或P <0.05）。与MC组比较，XFC组大鼠滑膜、肺组织Smad2、Smad3、Smad4mRNA和TGF-β1、TβRI、TβRⅡ、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达降低， Smad7mRNA、蛋白表达升高（P <0.01或P <0.05）。与MTX组比较，XFC组滑膜、肺组织TGF-β1、Smad3mRNA和TGF-β1、Smad2/3蛋白表达降低，肺Smad4mRNA、TβRI蛋白降低，滑膜、肺组织Smad7mRNA升高（P <0.05）；与TPT组比较，XFC组滑膜Smad3mRNA和TGF-β1、p-Smad2/3、Smad4蛋白降低，Smad7蛋白升高（P <0.05），肺组织p-Smad2/3降低，Smad7mRNA升高（P <0.05）。3.2.7AA大鼠滑膜、肺组织ERK1/2变化及XFC对其影响相关分析显示：AA大鼠肺功能FEV1与ERK2mRNA呈负相关，FEF25与p-ERK1/2蛋白呈负相关，FEF75、MMF分别与ERK1/2、p-ERK1/2蛋白呈负相关（P <0.05）。肺组织ERK1mRNA与Smad3mRNA、TβRⅡ蛋白呈正相关，ERK2mRNA与p-Smad2/3呈正相关，ERK1/2蛋白与Smad2mRNA、Smad4蛋白呈正相关，p-ERK1/2蛋白与Smad4mRNA、p-Smad2/3蛋白呈正相关（P <0.05）；p-ERK1/2蛋白与Smad7蛋白呈负相关（P <0.05）。与NC组比较，MC组大鼠滑膜组织ERK2mRNA、p-ERK1/2蛋白表达升高，肺组织ERK1、ERK2mRNA、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达升高（P <0.01或P <0.05）。与MC组比较，XFC组大鼠滑膜组织ERK2mRNA、p-ERK1/2蛋白表达降低，肺组织ERK1、ERK2mRNA、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白降低（P<0.01或P <0.05）。与MTX组比较，XFC组肺组织ERK1、ERK2mRNA表达降低（P<0.05）。4结论4.1AA大鼠肺功能的变化4.1.1AA大鼠肺功能损伤特点：AA大鼠存在肺功能损伤，肺功能变化以参数FEV1、MMF、PEF、FEF50、FEF75降低为主，主要表现特征为通气功能障碍，并伴有一定程度的小气道功能损伤。4.1.2Smads和ERK通路cross-talk导致肺功能降低：Smads和ERK通路在启动子TGF-β1诱导下，逐渐被磷酸化激活，进而进入细胞核参与转录活动，导致AA肺部病变发生，出现肺功能降低。4.1.3RA肺功能降低中医病机呈“脾虚湿盛”特征：“脾虚”在RA肺功能损伤发生、发展中起重要作用，脾气亏虚，正气不足，肺气虚弱；脾气亏虚，痰湿内生，肺失治节；脾气亏虚，痰瘀互结，肺络阻滞。4.2“健脾化湿通络”中药XFC对AA大鼠的疗效4.2.1XFC能明显抑制AA大鼠关节炎症反应：XFC能降低AA大鼠足趾肿胀度和AI，减少炎细胞对关节滑膜的浸润，减轻局部充血和肿胀，抑制血管翳的形成，改善关节功能。4.2.2XFC能明显改善AA大鼠肺功能水平：XFC通过提高肺功能参数FEV1、FEF50、FEF75、MMF、PEF表达，改善AA大鼠肺部通气功能和小气道功能，增强肺部气体交换率，提高肺功能水平。4.2.3XFC能明显提高AA大鼠体质量：XFC通过健脾益气、化湿通络的功效，能明显提高AA大鼠食欲及饮水量，增加体质量水平，改善全身症状和机能活动。4.2.4XFC能明显调节AA大鼠肺组织形态学：XFC能减轻炎性细胞浸润程度，通过抑制炎性介质对肺组织的刺激，降低AA大鼠肺间质纤维化程度，维持Ⅱ型肺泡细胞细胞器的功能和形态。4.3XFC改善AA大鼠肺功能的机制4.3.1XFC可降低AA大鼠关节炎症反应提高肺功能：XFC通过抑制滑膜组织炎细胞浸润，降低全身炎症反应，减少炎症介质渗出及对肺组织器官的刺激，抑制肺间质病变的发生，改善肺功能水平。4.3.2XFC可减轻AA大鼠肺部炎症反应提高肺功能：XFC通过抗炎作用，减少炎性介质对肺泡的直接刺激，促进中性粒细胞等炎细胞的吸收或清除，降低肺组织炎症反应，改善肺功能水平。4.3.3XFC可调节AA大鼠细胞因子平衡提高肺功能：XFC通过上调IL-10、IFN-γ、FGF表达，下调IL-1β、IL-4、TGF-β1、CTGF表达，抑制AA大鼠肺间质纤维化的发生，提高肺功能水平。4.3.4XFC可改善AA大鼠肺组织形态学提高肺功能：XFC通过减少炎性渗出物对肺组织损伤，保持肺组织病理形态学，维持肺泡Ⅱ型上皮细胞结构，增加肺泡的通气功能和弥散功能，改善肺功能。4.3.5XFC可调节AA大鼠TGF-β1/Smads通路提高肺功能：XFC通过提高Smad7表达，抑制p-Smad2/3与Smad4的结合及阻止Smad2/3磷酸化，延缓AA大鼠肺纤维化的发生，改善肺功能。4.3.6XFC可抑制AA大鼠ERK1/2通路表达提高肺功能：XFC通过抑制ERK1/2磷酸化过程，阻止信号通路的激活，减少致纤维化因子对肺组织的损伤，降低AA大鼠肺病变程度，改善肺功能。4.3.7XFC可调节AA大鼠Smads和ERK通路cross-talk提高肺功能：XFC通过调节信号通路cross-talk，降低信号传导与DNA的转录活动，抑制AA大鼠肺间质纤维化形成，改善肺功能。
戴启刚[4]（2013）在《金欣口服液对RSV诱导的TLR7信号转导通路的作用研究》文中提出肺炎为小儿时期的常见病,多为支气管肺炎,好发于冬春季节或气候交替之际,是我国住院小儿死亡的第一原因,严重威胁儿童健康,被世界卫生组织列为全球三种重要儿科疾病之一,我国卫生部也将其列为重点防治的小儿四病之一。据统计,肺炎占目前城市医院儿科病区住院病例的25%-50%；而病毒性肺炎是小儿肺炎的常见类型,约占小儿肺炎总数的50%。在引起小儿病毒性肺炎的病原体中又以呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus, RSV）为主,西医治疗小儿RSV肺炎缺乏有效的治疗手段,而中医药在治疗病毒感染性疾病方面有其独到的优势。导师汪受传教授领衔的课题组完成的临床研究表明,具有开肺化痰解毒活血功效的金欣口服液是治疗小儿病毒性肺炎痰热闭肺证的有效方剂。前期实验研究结果表明,金欣口服液有明显抑制RSV的作用,主要通过抑制病毒的膜融合,其作用位点可能是病毒的F蛋白或其受体；可明显减低RSV感染后Hep-2细胞病变程度,对细胞有保护作用；具有诱导单个淋巴细胞产生IL-2、IFN-γ的作用,增强机体抗病毒免疫功能。Toll样受体（Toll-like receptors, TLRs）是重要的模式识别受体（pattern recognition receptors, PRRs）,可以识别不同微生物的病原相关分子模式（pathogen associated molecule pattem, PAMPs）。TLRs在RSV感染过程中发挥着重要的作用,是研究RSV感染的新的方向。导师汪受传教授带领的团队承担的国家自然科学基金项目“金欣口服液对RSV活化的TLRs信号转导通路作用机制研究（81072840）”前期研究成果已表明金欣口服液能调控RSV感染活化诱导的TLR3、TLR4及下游信号分子的表达水平。RSV是单股负链RNA病毒,粘附融合宿主细胞后释放单链RNA,能被位于内体膜上的TLR7特异性识别,通过一系列信号传导途径,引起下游细胞因子的大量分泌,引起系统性炎症反应。鉴于中医药作用的多靶点性,本实验从TLR7及其介导的信号通路入手,探讨RSV感染时金欣口服液抗对TLR7信号转导通路的调控,及与其它TLRs的相关性。目的研究金欣口服液对RSV诱导的TLR7信号传导通路的调控作用,探讨其治疗RSV肺炎的可能免疫学机制。方法体外实验：RSV感染体外培养的RAW264.7细胞,采用金欣口服液含药血清进行干预,24h后收集细胞,real-time PCR法测定TLR7及其信号通路关键分子MyD88、NF-κB、IRF7mRNA的表达变化；Western Blot技术检测TLR7、 MyD88、NF-κB、IRF7蛋白表达,激光共聚焦技术检测TLR7在RSV感染RAW264.7细胞中的表达及分布；ELISA法检测细胞上清中TNF-α、IFN-α表达情况；并用TLR7siRNA干扰后检测上述指标,观察金欣口服液对RSV诱导的TLR7传导通路影响及与其它TLRs信号通路的相关性。体内实验：RSV滴鼻感染BALB/c小鼠,金欣口服液进行干预,并于首次滴鼻后72、144小时,取小鼠肺组织,分别行病理组织切片评价肺部病变情况,real-time PCR法检测肺组织中TLR7、MyD88、NF-κB、IRF7mRNA表达情况,Western Blot法检测小鼠肺组织TLR7、MyD88、NF-κB、IRF7蛋白表达情况；取小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）, ELISA法检测TNF-α、IFN-α表达情况。结果一、体外实验1.TLR7siRNA转染前（1）RSV感染RAW264.7细胞24h后,TLR7、NF-κB、IRF7mRNA表达明显升高（超过正常组2倍以上,与正常组比较,P<0.01）,对MyD88mRNA的表达能提高,但没超过2倍：金欣口药血清组能明显降低TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达（P<0.01）,对IRF7mRNA的表达下调作用不明显（P>0.05）。（2）RSV感染RAW264.7细胞24h后,TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达量较正常组明显升高（P<0.01）,而IRF7的蛋白表达无明显改变；金欣口服液含药血清组TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达量较RSV感染组明显降低（P<0.01）；对IRF7的蛋白表达无调控作用。（3）RSV感染RAW264.7细胞24h后,细胞培养上清中IFN-α未能检测到；TNF-α表达量明显升高（与正常组比较,P<0.01）。金欣口服液含药血清显着降低TNF-α表达（P<0.01）。2. TLR7siRNA转染后（1） TLR7siRNA转染RAW264.7细胞后,TLR7mRNA的表达量下降46.6%,再用RSV感染,可见TLR7mRNA的表达又有明显增高（超过TLR7siRNA转染组的2倍以上）,表明用筛选出的TLR7siRNA可干扰TLR7mRNA的生成。TLR7信号通路下游信号分子MyD88、NF-κB mRNA的表达也受到抑制,但其抑制率低于TLR7mRNA（分别为26.9%、27.3%）,未成平行抑制关系,表明MyD88、NF-κB mRNA的表达可能还受其它因素的调控,特别是TLRs家族的其它成员。TLR7siRNA转染后IRF7mRNA的表达未受明显影响。（2）金欣口药血清能明显降低转染及RSV感染后的TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达（P<0.01）,对IRF7mRNA的表达下调作用不明显（P>0.05）。（3）RSV感染RAW264.7细胞24h后,TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达量较正常组明显升高（P<0.01）,而IRF7的蛋白表达无明显改变；金欣口服液含药血清组能明显下调TLR7、NF-κB蛋白表达量（P<0.01）,但对MyD88的调控不明显（P>0.05）；对IRF7的蛋白表达无调控作用。（4） TLR7siRNA转染后继以RSV感染RAW264.7细胞24h后,细胞培养上清中IFN-α仍未能检出；TNF-α表达量明显升高（与正常组比较,P<0.01）,金欣口服液含药血清显着降低TNF-α表达（P<0.01）。二、体内试验（1）RSV感染BALB/c小鼠后肺部病理改变主要表现为肺间质性病变,肺泡壁血管扩张充血,水肿增厚,肺泡壁及间质炎性细胞浸润；肺泡腔无明显渗出物；支气管腔内无显着炎性渗出物,上皮细胞无显着变性、坏死。随着感染时间的延长,肺部病变程度逐渐加重。金欣口服液组小鼠肺内炎症均有不同程度减轻,病理评分结果显示治疗组各时间点与RSV感染组相比均有统计学显着性差异。（2）RSV感染BALB/c小鼠72h后,肺组织中TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达显着增高（与正常组比较,P<0.01）,而144h组随着感染时间的延长,TLR7、 MyD88、NF-κB mRNA的表达则下降。金欣口服液组TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达较RSV感染组不同程度降低（P<0.01或P<0.05）。RSV感染BALB/c小鼠72、144h后,肺组织中IRF7mRNA表达量与正常组比较无统计学差异（P>0.05）,金欣口服液高剂量组在感染72h能下调IRF7mRNA表达（P<0.05）,金欣口服液高剂量组、等效剂量组在144h能上调IRF7mRNA表达,但无统计学差异（P>0.05）。（3）RSV感染BALB/c小鼠72h后肺组织内TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达量较正常组高（P<0.01或P<0.05）,144h表达下降与正常组无明显差异。金欣口服液组TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达量于72h较RSV感染组不同程度降低（P<0.01或P<0.05）,感染144h金欣口服液组TLR7、MyD88、NF-κB表达量下降较RSV组差异无统计学意义（P>0.05）。RSV感染BALB/c小鼠72h后肺组织内IRF7蛋白表达量较正常组无显着差异（P>0.05）,144h表达较正常有所上升（P>0.05）。金欣口服液组IRF7蛋白表达量于72h较RSV感染组无统计学差异,感染144h金欣口服液组能上调IRF7蛋白表达（P<0.01）。（4）RSV感染BALB/c小鼠72h后,BALF中TNF-α、IFN-α表达量均明显升高（与正常组比较,P<0.01）;144h, BALF中TNF-α、IFN-α下降。72h,金欣口服液组小鼠BALF中TNF-α、IFN-α表达较感染组显着上升,随着感染时间的延长,144h金欣组TNF-α、IFN-α表达明显下降。结论1.金欣口服液能明显减轻RSV感染小鼠的肺部炎症。2.金欣口服液对TLR7信号通路TLR7、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达有明显的调控作用,对IRF7的表达在RSV感染早期无明显调控,晚期可上调IRF7的表达。3.金欣口服液能够显着上调RSV感染初期TLR7介导的信号通路下游TNF-α、IFN-α等炎症细胞因子的表达；随着感染时间的延长,金欣口服液能适当下调TNF-α、IFN-α的表达,具有双向动态调节作用。4.金欣口服液是治疗RSV感染的有效药物,其作用是通过调节RSV诱导的TLR7信号通路实现的,主要依赖的是TLR7/MyD88/NF-κB/TNF-α途径,在我们的实验中发现TLR7/MyD88/IRF7/IFN-α途径在RSV感染早期作用不明显。5. TLR7siRNA转染后,TLR7mRNA及蛋白表达明显受抑,但MyD88、 NF-κB mRNA及蛋白的抑制率低于TLR7,表明MyD88、NF-κB的表达还受其它TLRs调控,从而说明TLR7信号通路只是RSV感染后的一个通路,而金欣口服液亦可通过其它通路调控下游信号分子生成,体现了中药复方发挥作用的多靶点效应；TLR7siRNA转染与否对IRF7的表达无明显影响。
夏晨[5]（2011）在《金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠血清白介素6、8、12作用的实验研究》文中认为人呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus, RSV）是婴幼儿呼吸道感染疾病的最重要的病原。RSV感染后可使机体辅助性T细胞1（Thl）和2（Th2）比例失调,释放-系列细胞因子,造成免疫病理损伤。其中IL-6、IL-8、IL-12是肺内重要的细胞因子,同时也是Toll样受体（Toll-like receptors, TLRs）信号转导通路的重要角色。它们参与了RSV感染的发生、发展过程,在促进炎症反应和机体免疫防御中有着重要作用。临床和实验研究表明,金欣口服液有拮抗RSV感染的作用,其作用机制尚未明确,推测金欣口服液可能通过影响细胞因子的表达来发挥其抗病毒作用。本研究在此基础上进行。目的：1.观察在RSV感染中血清IL-6、IL-8和IL-12的水平,探讨它们在RSV感染中的作用；2.观察金欣口服液对RSV感染大鼠血清IL-6、IL-8、IL-12的影响,探讨其抗RSV感染的作用机制。方法：本实验采用细胞培养学、实验动物学、分子免疫学、ELISA（酶标记免疫吸附测定）法检测大鼠体内IL-6、8、12表达量的变化。数据采用SPSS16.0软件进行统计学处理。结果：1.感染RSV后IL-6、IL-8水平均高于正常组（P<0.05）,IL-12水平明显下降（P<0.01）；2.金欣口服液干预后高、中、低剂量组及预先给药组IL-6、IL-8水平较模型组显着降低（P<0.01）,高、中剂量组及预先给药组的IL-12水平显着升高（P<0.01）。3.与利巴韦林组比,金欣口服液高剂量组、预先给药组的IL-6表达量明显降低（P<0.01）；金欣口服液高、中剂量组及预先给药组的IL-12水平明显升高（P<0.01）。4.通过预先给药,IL-6水平低于金欣口服液中、低剂量组（P<0.01）,IL-8水平比高、中、低剂量组均显着降低（P<0.01）,而IL-12含量比余给药组均增加（P<0.01）。结论：1.IL-6、IL-8、IL-12是RSV感染中重要的细胞因子。RSV感染后IL-6、IL-8水平上升,IL-12水平则降低。2.金欣口服液具有拮抗RSV的作用,可降低RSV感染大鼠血清中IL-6、IL-8的表达,上调IL-12的表达。这可能是金欣口服液抗RSV肺炎的机理之一
吴琴琴[6]（2010）在《清肺口服液对RSV感染人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BBmRNA基因表达的影响》文中研究表明目的：评价清肺口服液对呼吸道合胞病毒（RSV）的抑制作用及其量效关系,探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒（RSV）感染人胚肺成纤维细胞（HELF）转化生长因子-β1 （TGF-β1）、血小板衍生生长因子-BB （PDGF-BB）基因表达的影响。方法：以利巴韦林为对照组,采用MTT法,观察清肺口服液不同给药剂量对RSV的拮抗作用。RSV攻击体外培养的HELF细胞后,分别以清肺口服液含药血清,利巴韦林含药血清及空白血清干预,采用实时荧光定量PCR法（RealTime-PCR）测定各组人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达变化。结果：清肺口服液含药血清对HELF细胞的最大无毒浓度为20%,且具有明显抗RSV的作用,与利巴韦林无显着性差异。病毒对照组较正常细胞组PDGF-BB上升为3倍、TGF-β1下降为1/3,清肺口服液含药血清组可显着降低PDGF-BB至RSV感染细胞的1/5、升高TGF-β1至RSV感染细胞的2倍。利巴韦林含药血清和空白血清作用相似,对TGF-β1、PDGF-BB表达有一定的影响。结论：（1）RSV感染可使HELF细胞PDGF-BB mRNA表达水平显着升高,TGF-β1mRNA表达水平显着下降；（2）清肺口服液可调节TGF-β1、PDGF-BB等细胞因子的mRNA表达,缓减RSV感染后细胞的异常变化,这可能是其抗病毒作用机制之一。总言之,清肺口服液可以拮抗RSV病毒,是治疗RSV感染的有效复方制剂。
周娣[7]（2010）在《金欣口服液对RSV肺炎SD幼大鼠血清肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-10的影响》文中研究说明呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus, RSV）是引起婴幼儿毛细支气管炎和肺炎的主要原因,其发病机制仍不甚明确。中医药治疗病毒性肺炎（包括RSV肺炎）,在临床及实验研究中发现均有着一定优势。随着近代实验研究的发展,发现某些病毒性疾病的发生与机体细胞炎症因子之间的平衡失调有关,RSV感染与细胞促炎症因子及抗炎症因子水平的失衡关系亦密切。病毒感染早期,机体可能通过促进局部受染细胞分泌某些细胞因子来调节病毒在宿主细胞内的炎症反应,而病毒则可能通过抑制宿主细胞内某些细胞因子分泌而复制和繁殖。前期体内外实验研究均证实金欣口服液具有拮抗RSV作用,但作用机制尚未明确。推测金欣口服液在RSV感染宿主细胞早期通过调节体内炎症细胞因子水平的释放进而实现抗病毒作用。本研究在此基础上进行。通过检测RSV感染肺炎SD幼大鼠后,血清肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-10的变化情况,从分子的角度探讨金欣口服液对机体免疫的调节作用机制。并通过分析金欣口服液对RSV感染肺炎SD幼大鼠血清肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-10的影响,探讨RSV感染致肺炎的相关机制。本实验采用细胞培养、实验动物学、ABC-ELISA法等相关的实验技术和方法进行实验的研究。对于实验数据采用SPSS13.0软件进行统计学处理。病毒感染后机体的促炎症细胞因子TNF-α与正常组相比下降,抗炎症细胞因子IL-10的含量与正常组相比上升,有统计学意义（P<0.05）,TNF-α/IL-10的比值较正常值降低。金欣口服液提前用药、高、中、低剂量组,TNF-α的含量与病毒对照组相比均有不同程度的升高,差异有统计学意义（P<0.05）,其中以提前给药组增高最为明显,高剂量组次之。提前给药组、高、中剂量组IL-10含量较病毒对照组增高,差异无统计学意义,与利巴韦林组比较差异有统计学意义（P<0.05）。TNF-α/IL-10的比值与金欣口服液的浓度比例关系不明显,其中以低剂量组最高,高剂量组次之,均低于正常组。经利巴韦林治疗后,TNF-α水平升高,IL-10的含量降低,与病毒对照组之间的差异均有统计学意义（P<0.05）,TNF-α/IL-10的比值恢复正常。RSV感染SD幼大鼠后影响机体的免疫状态,金欣口服液对于免疫系统具有调节作用。TNF-α作为前炎症细胞因子,在RSV肺炎过程中可以通过上调IL-10的含量调节机体的免疫水平,维持免疫的平衡状态。金欣口服液在上调促炎症细胞因子TNF-α的含量的同时促进抗炎症细胞因子IL-10的释放,发挥抗病毒作用。
张沛[8]（2010）在《金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠Ⅰ型干扰素表达调节作用的实验研究》文中认为病毒性肺炎是小儿肺炎的常见类型,约占小儿肺炎总数的50%。呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial viral,RSV）肺炎是小儿病毒性肺炎中最常见的类型,严重威胁着儿童的身体健康。关于RSV肺炎,现代医学并没有特异的治疗措施,临床上也没有明确有效的RSV疫苗面市。而中医药治疗病毒性肺炎包括RSV肺炎,有着一定优势。Ⅰ型干扰素（IFN）-α/β,在呼吸道病毒感染中起重要的作用,是自然免疫重要的组成部分,能在病毒感染的早期抑制病毒复制。但RSV感染难以诱生干扰素,而且大多会下调IFN的抗病毒反应。临床和实验研究表明,金欣口服液有拮抗RSV感染的作用,但其作用机制尚未明确。推测金欣口服液可能通过上调RSV感染宿主体内IFN-Ⅰ的表达来发挥其抗病毒作用。本研究在此基础上进行。目的：1.探究大鼠RSV肺炎模型的构建。2.检测金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠IFN-Ⅰ表达的调节。方法：本实验采用细胞培养学、实验动物学、分子免疫学、ELISA（酶标记免疫吸附测定）法检测大鼠体内IFN-Ⅰ表达量的变化。数据采用SPSS13软件进行统计学处理。结果：1.RSV感染大鼠渐出现体温升高、活动度下降、呼吸急促、毛乱及偶有咳嗽的临床表现,各感染组大鼠与对照组大鼠比较,体温变化无明显差别。病毒感染对大鼠的一般状况影响不大。给药组与模型组比较,体重差异有显着性意义。2.RSV感染组大鼠肺部病理学切片呈现典型的炎症表现,且肺部可分离出RSV病毒。提示本实验中采用的RSV感染大鼠模型是成功的。3.ELISA法检测：预防组和金欣口服液中剂量组IFN-α表达量高于模型组（P<0.05）；金欣口服液高、中剂量组IFN-β表达量高于模型组（P<0.05）；预防组、金欣口服液中剂量组和利巴韦林组IFN-β表达量高于空白对照组（P<0.01）；预防组、金欣口服液中剂量组和利巴韦林组IFN-β表达量高于金欣口服液低剂量组（P<0.01）。结论：1.幼大鼠RSV滴鼻可复制出RSV肺炎模型。2.金欣口服液具有拮抗呼吸道合胞病毒的作用。3金欣口服液可上调RSV感染宿主体内Ⅰ型干扰素的表达,从而发挥Ⅰ型干扰素的抗病毒效应。这也是金欣口服液抗RSV感染的机理之一。
胡钰[9]（2009）在《金欣口服液拮抗呼吸道合胞病毒影响细胞早期凋亡的实验研究》文中研究说明呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus,RSV）是引起婴幼儿毛细支气管炎和肺炎的主要原因,其发病机制仍不甚明确。关于RSV肺炎,现代医学并没有特异的治疗措施,临床上也没有明确有效的RSV疫苗面市。而中医药治疗病毒性肺炎包括RSV肺炎,有着一定优势。某些病毒性疾病的发生与机体细胞凋亡的规律失常有关,RSV感染与细胞凋亡关系密切。病毒感染早期,机体可能通过促进局部受染细胞的凋亡来限制病毒在宿主细胞内的复制,而病毒则可能通过抑制宿主细胞凋亡的发生以利于子代病毒的复制和繁殖。体内外实验研究均证实金欣口服液具有拮抗RSV作用,但作用机制尚未明确。推测金欣口服液在RSV感染宿主细胞早期,通过拮抗RSV抑制细胞凋亡的进程实现抗病毒作用。本研究在此基础上进行。目的:1.检测RSV感染细胞早期（12h、24h）宿主细胞凋亡率及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达量的影响,探讨RSV感染宿主细胞早期的相关机制。2.检测金欣口服液含药血清对RSV感染早期细胞凋亡率及Bcl-2、Bax表达量的影响,探讨金欣口服液拮抗RSV的相关机制。方法:本实验采用细胞培养、血清药理学、细胞形态学观察、RealTime-PCR、AnnexinⅤ/PI法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率及Bcl-2、Bax表达量的变化。数据采用SPSS13软件进行统计学处理。结论:1.金欣口服液具有拮抗呼吸道合胞病毒作用。2.呼吸道合胞病毒在感染宿主细胞早期可能通过抑制细胞凋亡以利于自身的复制与增殖。3.金欣口服液治疗RSV肺炎,在RSV感染早期,通过逐步下调抑凋亡基因Bcl-2、上调促凋亡基因Bax的表达以拮抗RSV感染宿主细胞早期的抑制细胞凋亡作用,影响进入细胞内病毒的复制增殖过程,从而阻止病毒的扩散,减轻RSV对机体的损伤。
赵长江[10]（2009）在《清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎痰热闭肺证的临床及免疫机理研究》文中进行了进一步梳理目的:确定清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎的有效性和安全性。观察清肺口服液含药血清对RSV感染后人胚肺成纤维细胞转化生长因子-β1和血小板衍生生长因子-BB mRNA基因表达的影响。方法:选取RSV肺炎痰热闭肺证患儿62例,随机分组,试验组27例,治疗用清肺口服液口服加生理盐水静滴,对照组35例,治疗用利巴韦林静滴加口服液安慰剂口服,以发热、咳嗽、气喘、痰壅及肺部听诊及X线检查为主要疗效指标,以临床积分及症状消失率等定量依据观察疗效。采用实时荧光定量PCR法观察清肺口服液含药血清对RSV攻击后人胚肺成纤维细胞TGF-β1和PDGF-BB mRNA表达变化的影响。结果:两组咳嗽、痰壅、肺部听诊及X线检查改善情况比较,试验组疗效优于对照组,气喘和发热改善方面两组疗效相近。治疗前后两组主症积分、次症积分及总积分减少情况比较,试验组疗效优于对照组。试验组痊愈率及显效率等综合疗效显着优于对照组。实验研究表明,RSV感染后HELF细胞TGF-β1mRNA表达降低,PDGF-BB mRNA表达升高,清肺口服液含药血清作用后,RSV感染后HELF细胞TGF-β1mRNA表达水平升高,PDGF-BBmRNA表达下降。结论:清肺口服液是治疗小儿RSV肺炎痰热闭肺证安全有效制剂。清肺口服液可调节TGF-β1和PDGF-BB mRNA基因表达,通过免疫学机制起治疗作用。
二、开肺化痰解毒法对人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、开肺化痰解毒法对人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响（论文提纲范文）
（1）基于MAPKs信号通路研究黄芩苷对脂多糖所致HBE16细胞粘液高分泌的干预机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词 |
| 引言 |
| 实验部分 |
| 1.细胞来源 |
| 2.实验相关试剂和材料 |
| 3.实验所需仪器 |
| 4.实验方法和步骤 |
| 4.1 实验相关试剂配置 |
| 4.2 冻存细胞的复苏、培养、传代 |
| 4.3 细胞模型的建立 |
| 4.4 实验细胞分组 |
| 4.5 收集实验标本 |
| 4.6 细胞培养上清液中 MUC5ac 的定量检测 |
| 4.7 RT-PCR法检测细胞RNA中 MUC5ac mRNA表达水平 |
| 4.8 Western Blotting法检测MAPK信号通路关键蛋白p-Erk、p-JNK、p-P38 的表达水平 |
| 5.数据处理及统计方法 |
| 结果 |
| 1.ELISA法测定MUC5ac蛋白表达 |
| 2.RT-PCR法测定MUC5ac mRNA的表达 |
| 3.Western Blotting法测定MAPKs信号通路中关键蛋白的表达 |
| 3.1 MAPKs信号通路中关键蛋白phospho-Erk的表达 |
| 3.2 MAPKs信号通路中关键蛋白phospho-JNK的表达 |
| 3.3 MAPKs信号通路关键蛋白phospho-p38 的表达 |
| 讨论 |
| 1.中医对COPD的认识 |
| 2.中医对肺胀病的治疗 |
| 3.COPD气道粘液高分泌机制 |
| 4.黄芩苷抗炎机制 |
| 5.MAPKs信号通路 |
| 6.LPS诱导气道粘液高分泌模型的建立 |
| 7.结果分析 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附件1:综述 |
| 参考文献 |
| 附件2:在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（2）清肺口服液对RSV感染小鼠Treg/Th17及IL-2和IL-17水平的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 基础研究 |
| 1. 祖国医学对呼吸道合胞病毒肺炎的认识 |
| 1.1 病名演变 |
| 1.2 病因病机 |
| 1.3 辨证分型 |
| 1.4 治则治法 |
| 1.5 其他疗法 |
| 1.6 中医药治疗儿童肺炎的机理研究进展 |
| 2. 现代医学关于RSV肺炎的认识 |
| 2.1 呼吸道合胞病毒 |
| 2.2 RSV肺炎 |
| 2.3 RSV肺炎西医治疗研究进展 |
| 3. 清肺口服液的前期研究 |
| 3.1 清肺口服液的组方依据 |
| 3.2 前期临床研究 |
| 3.3 前期实验研究 |
| 第二部分 实验部分 |
| 1. 材料 |
| 1.1 BLAB/c小鼠 |
| 1.2 细胞 |
| 1.3 病毒株 |
| 1.4 实验药物 |
| 1.5 实验试剂 |
| 1.6 仪器 |
| 2. 方法 |
| 2.1 细胞的复苏及培养 |
| 2.2 RSV的扩增 |
| 2.3 RSV TCID50的测定 |
| 2.4 实验分组 |
| 2.5 统计方法 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 TCID_(50) |
| 3.2 各组小鼠肺组织病理改变 |
| 3.3 各组小鼠BALF中IL-2、IL-17的表达水平 |
| 3.4 各组小鼠脾脏细胞中Treg/Th17水平的影响 |
| 第三部分 讨论 |
| 1. 清肺口服液对小鼠病理变化的影响 |
| 2. 清肺口服液抗呼吸道合胞病毒的机制 |
| 2.1 恢复Treg/Th17的平衡状态 |
| 2.2 影响IL-2的表达水平 |
| 2.3 影响IL-17的表达水平 |
| 3. 研究结果 |
| 4. 不足与创新 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（3）基于TGF-β1/Smads和ERK通路cross-talk研究新风胶囊改善AA大鼠肺功能的机理（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.本论文研究总体思路 |
| 1.1 RA 患者存在肺功能损伤 |
| 1.2 影响 RA 肺功能降低的因素 |
| 1.3 RA 肺功能降低的治疗 |
| 2.TGF-β1/Smads 信号通路激活促使 RA 肺功能降低 |
| 2.1 TGF-β1、Smads 概述 |
| 2.2 TGF-β1 与其受体磷酸化是 RA 肺功能损伤始动力 |
| 2.3 p-Smad2/3 与 Smad4 结合是 RA 肺功能损伤中间环节 |
| 2.4 Smads7 抑制功能降低是 RA 肺功能损伤的关键因素 |
| 3.ERK 信号通路诱导 RA 肺功能降低 |
| 3.1 TGF-β1 可诱导 CTGF、FGF 促使 ERK1/2 磷酸化 |
| 3.2 ERK1/2 磷酸化促进 RA 肺间质纤维化 |
| 3.3 ERK 信号通路的激活导致 RA 肺功能降低 |
| 4.TGF-β1/Smads 和 ERK 通路“串话”是 RA 肺功能下降的重要因素 |
| 4.1 Smad 通路依赖 ERK 的磷酸化而促进 RA 肺功能降低 |
| 4.2 ERK 通路受 Smads 通路调控而促使 RA 肺功能降低 |
| 4.3 ERK 和 Smads 信号通路的协同作用导致 RA 肺功能降低 |
| 5.RA 肺功能降低中医学病机分析 |
| 6.“脾虚”是 RA 肺功能降低的发病基础 |
| 6.1 脾气亏虚，正气不足，肺气虚弱 |
| 6.2 脾气亏虚，痰湿内生，肺失治节 |
| 6.3 脾气亏虚，痰瘀互结，肺络阻滞 |
| 7.“健脾化湿通络法”明显改善 RA 肺功能水平 |
| 7.1 XFC 能明显改善关节和全身症状体征 |
| 7.2 XFC 明显改善肺部症状体征 |
| 7.3 XFC 明显提高肺功能的弥散功能和通气功能 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验研究一 AA 大鼠关节症状体征、形态学变化及XFC 对其影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 主要药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 模型复制及给药 |
| 1.5 观察指标 |
| 1.6 统计学处理 |
| 2.研究结果 |
| 2.1 AA 大鼠足趾肿胀度和 AI 变化及 XFC 对其影响 |
| 2.2 XFC 对 AA 大鼠体质量的影响 |
| 2.3 XFC 对 AA 大鼠关节病理形态学的影响 |
| 2.4 XFC 对 AA 大鼠滑膜超微结构的影响 |
| 实验研究二 AA 大鼠肺功能、肺组织形态学变化及 XFC 对其影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 模型复制及给药 |
| 1.5 观察指标 |
| 1.6 统计学处理 |
| 2.研究结果 |
| 2.1 AA 大鼠肺功能参数与足跖肿胀度、AI、肺系数和 Szapiel 积分关系 |
| 2.2 XFC 对 AA 大鼠肺功能的影响 |
| 2.3 XFC 对 AA 大鼠肺系数和肺泡炎的影响 |
| 2.4 XFC 对 AA 大鼠肺组织病理形态学的影响 |
| 2.5 XFC 对 AA 大鼠Ⅱ型肺泡细胞超微结构的影响 |
| 实验研究三 AA 大鼠血清细胞因子变化及 XFC 对其影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 主要药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 模型复制及给药 |
| 1.5 观察指标 |
| 1.6 统计学处理 |
| 2.研究结果 |
| 2.1 AA 大鼠肺功能参数与血清细胞因子的关系 |
| 2.2 XFC 对 AA 大鼠血清细胞因子 IL-1β、IFN-γ、IL-4、IL-10 和 Th 细胞影响 |
| 2.3 XFC 对 AA 大鼠血清生长细胞因子 TGF-β1、CTGF、FGF 影响 |
| 实验研究四 AA 大鼠滑膜、肺组织 TGF-β1/Smad 通路变化及 XFC 对其影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 主要药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 模型复制及给药 |
| 1.5 观察指标 |
| 1.6 统计学处理 |
| 2.研究结果 |
| 2.1 AA 大鼠肺功能与肺组织 TGF-β1/Smads 通路的关系 |
| 2.2 XFC 对 AA 大鼠滑膜 TGF-β1/Smads mRNA 影响 |
| 2.3 大鼠肺组织 TGF-β1、Smad 2、Smad3、SmadSmad7mRNA 的变化 |
| 2.4 XFC 对 AA 大鼠滑膜组织 TGF-β1/Smads通路蛋白影响 |
| 2.5 大鼠肺组织 TGF-β1/Smads 通路蛋白变化 |
| 实验研究五 AA 大鼠滑膜、肺组织 ERK 变化及 XFC 对其影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 主要药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 模型复制及给药 |
| 1.5 观察指标 |
| 1.6 统计学处理 |
| 2.研究结果 |
| 2.1 AA 大鼠肺功能参数与肺组织 ERK1/2 通路的关系 |
| 2.2 AA 大鼠肺组织 Smads 和 ERK 通路的关系 |
| 2.3 XFC 对 AA 大鼠滑膜、肺组织 ERK1、ERK2 mRNA 影响 |
| 2.4 XFC 对 AA 大鼠滑膜、肺组织 ERK1/2、p-ERK1/2 蛋白影响 |
| 讨论 |
| 1. RA 肺功能变化特点及其相关性分析 |
| 1.1 RA 肺功能变化特点 |
| 1.2 AA 大鼠肺功能变化的相关分析 |
| 2.RA 肺功能降低“从脾论治”的依据 |
| 2.1 理论依据 |
| 2.2 临床依据 |
| 2.3 实验依据 |
| 3.XFC 方解及其对 RA 肺功能的影响 |
| 3.1 黄芪 |
| 3.2 薏苡仁 |
| 3.3 蜈蚣 |
| 3.4 雷公藤 |
| 4.实验动物模型的选择 |
| 4.1 各种 RA 模型造模特点 |
| 4.2 AA 模型特点 |
| 5.主要观测指标选取的意义 |
| 5.1 Smads 通路 |
| 5.2 ERK1/2 通路 |
| 5.3 TGF-β1 |
| 5.4 IL-1β |
| 5.5 IFN-γ |
| 5.6 IL-4 |
| 5.7 IL-10 |
| 5.8 Thl/Th2 细胞 |
| 5.9 CTGF |
| 5.10 FGF |
| 6.XFC 对 AA 大鼠的疗效分析 |
| 6.1 XFC 能增加 AA 大鼠的体质量 |
| 6.2 XFC 能降低 AA 大鼠的足跖肿胀度、AI |
| 6.3 XFC 能降低 AA 大鼠的关节滑膜炎症反应 |
| 6.4 XFC 能改善 AA 大鼠滑膜超微结构 |
| 6.5 XFC 能调节 AA 大鼠细胞因子平衡 |
| 7.XFC 对 AA 大鼠肺功能系统的影响 |
| 7.1 XFC 能提高 AA 大鼠肺功能参数 |
| 7.2 XFC 能改善 AA 大鼠肺组织病理形态学 |
| 7.3 XFC 能改善 AA 大鼠肺泡超微结构 |
| 8.XFC 对 AA 大鼠 TGF-β1/Smads 和 ERK 通路的影响 |
| 8.1 XFC 能调节 AA 大鼠 TGF-β1、CTGF、FGF 表达 |
| 8.2 XFC 能调节 AA 大鼠关节、肺组织 TGF-β1/Smads 通路的基因表达 |
| 8.3 XFC 能调节 AA 大鼠关节、肺组织 ERK 通路的 基因表达 |
| 8.4 XFC 能调节 AA 大鼠关节、肺组织 TGF-β1/Smads 通路的蛋白表达 |
| 8.5 XFC 能调节 AA 大鼠关节、肺组织 ERK 通路的 蛋白表达 |
| 9.XFC 改善 AA 大鼠肺功能的作用机制 |
| 9.1 XFC 能降低关节炎症反应提高 AA 大鼠肺功能 |
| 9.2 XFC 能降低肺组织炎症提高 AA 大鼠肺功能 |
| 9.3 XFC 能调节细胞因子平衡提高 AA 大鼠肺功能 |
| 9.4 XFC 能改善肺组织病变提高 AA 大鼠肺功能 |
| 9.5 XFC 能调节关节、肺组织 TGF-β1/Smads 通路提高AA 大鼠肺功能 |
| 9.6 XFC 能抑制 ERK1/2 通路提高 AA 大鼠肺功能 |
| 9.7 XFC 能调节 TGF-β1/Smads 和 ERK1/2 通路串话 提高 AA 大鼠肺功能 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 研究生在校期间发表论文 |
| 着作 |
| 获奖情况 |
| 致谢 |
（4）金欣口服液对RSV诱导的TLR7信号转导通路的作用研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1. 中医学对RSV肺炎的认识 |
| 1.1 病名沿革 |
| 1.2 病因病机 |
| 1.3 辨证论治 |
| 1.4 导师汪受传教授对肺炎喘嗽的理论创新 |
| 2. 西医学对RSV肺炎的认识 |
| 2.1 RSV的生物学特征 |
| 2.2 RSV感染发病的免疫学机制 |
| 3 研究思路 |
| 第二部分 金欣口服液对RSV感染RAW264.7诱导的TLR7传导通路影响体外实验研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞 |
| 1.2 病毒 |
| 1.3 动物 |
| 1.4 药物 |
| 1.5 试剂 |
| 1.6 仪器及设备 |
| 1.7 溶液的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 金欣口服液及其含药血清的制备 |
| 2.2 Hep-2细胞及RAW264.7细胞的培养 |
| 2.3 RSV的扩增、组织培养半数感染量(TCID_(50))及药物最大无毒浓度的测定 |
| 2.4 RSV感染RAW264.7细胞模型的制备 |
| 2.5 实验分组、给药方案及标本的采集 |
| 2.6 实时荧光定量PCR法检测金欣口服液干预后RSV感染RAW264.7细胞TLR7、MyD88、IRF7、NF-KB mRNA的转录水平 |
| 2.7 细胞化学免疫荧光法及免疫印迹法测定金欣口服液干预后RSV感染RAW264.7细胞及BALB/c小鼠肺组织TLR7蛋白表达水平 |
| 2.8 ELISA法检测金欣口服液干预后RSV感染RAW264.7细胞上清TNF-α、IFN-α的表达水平 |
| 2.9 数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 RSV对RAW264.7细胞TCID50测定结果 |
| 3.2 金欣口服液含药血清、利巴韦林对RAW264.7细胞最大无毒浓度测定结果 |
| 3.3 金欣口服液对RSV感染RAW264.7细胞TLR7、MyD88、IRF7、NF-κB mRNA的转录水平的调控作用 |
| 3.4 细胞化学免疫荧光法检测金欣口服液对RSV感染RAW264.7细胞TLR7蛋白表达水平的影响 |
| 3.5 金欣口服液对RAW264.7细胞TLR7、MyD88、NF-KB、IRF7蛋白表达的影响 |
| 3.6 金欣口服液对RSV感染RAW264.7细胞上清液中TNF-a、IFN-a含量的影响 |
| 3.7 转染后金欣口服液对RAW264.7细胞TLR7、MyD88、NF-K8、IRF7 mRNA表达的影响 |
| 3.8 转染后金欣口服液对RAW264.7细胞TLR7、MyD88、NF-KB、IRF7蛋白表达的影响 |
| 3.9 转染后金欣口服液对RAW264.7细胞上清液中TNF-α、IFN-α含量的影响 |
| 第三部分 金欣口服液对RSV诱导的TLR7传导通路影响的体内实验研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 细胞、病毒 |
| 1.2 动物 |
| 1.3 金欣口服液的提取 |
| 1.4 试剂 |
| 1.5 仪器及设备 |
| 1.6 溶液的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验分组、给药方案及标本的采集 |
| 2.2 指标检测方法 |
| 2.3 数据统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 RSV感染BALB/c小鼠模型的制备及病理评价 |
| 3.2 金欣口服液对RSV感染BALB/c小鼠肺组织TLR7、MyD88、IRF7、NF-KB mRNA的转录水平的调控作用 |
| 3.3 金欣口服液对RSV感染BALB/c小鼠肺组织TLR7、MyD88、NF-KB、IRF7蛋白表达的调控作用 |
| 3.4 金欣口服液干预后RSV感染BALB/c小鼠BALF中TNF-α、IFN-α的表达水平的变化 |
| 肺组织切片附图 |
| 第四部分 讨论 |
| 第五部分 结语 |
| 1 结论 |
| 2 本文创新处 |
| 3 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词表 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠血清白介素6、8、12作用的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 绪论 |
| 第一部分 研究背景 |
| 1. 中医学对肺炎喘嗽的研究进展 |
| 1.1 肺炎喘嗽的病名 |
| 1.2 肺炎喘嗽的病因病机 |
| 1.3 肺炎喘嗽的辨证分型 |
| 1.4 肺炎喘嗽的治疗 |
| 2. 现代医学对RSV肺炎的研究进展 |
| 2.1 病原学研究 |
| 2.2 流行病学研究 |
| 2.3 临床治疗 |
| 3. RSV的实验研究进展 |
| 3.1 IL-6、IL-8和IL-12与RSV肺炎的相关性研究 |
| 3.2 Toll样受体在RSV肺炎中的作用 |
| 3.3 中医药抗RSV的实验研究 |
| 4. 总结 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1. 实验思路 |
| 2. 实验材料 |
| 3. 实验方法与步骤 |
| 3.1 人喉癌上皮细胞的培养 |
| 3.2 呼吸道合胞病毒的扩增 |
| 3.3 呼吸道合胞病毒组织培养半数感染量 (TCID_50) 的测定 |
| 3.4 RSV感染大鼠造模病毒剂量实验 |
| 3.5 RSV肺炎大鼠造模肺组织病变程度实验 |
| 3.6 金欣口服液对RSV肺炎大鼠血清IL-6、IL-8和IL-12的影响 |
| 4. 统计学方法 |
| 5. 实验结果 |
| 5.1 呼吸道合胞病毒组织培养半数感染量的测定结果 |
| 5.2 各组大鼠一般情况 |
| 5.3 各组大鼠体温、体重及摄食量 |
| 5.4 各组大鼠病理结果 |
| 5.5 各组大鼠血清中IL-6、IL-8、IL-12的水平 |
| 第三部分 总结与讨论 |
| 1. RSV肺炎动物造模 |
| 1.1 动物模型的选择 |
| 1.2 RSV造模方法的选择 |
| 1.3 造模结果分析 |
| 2. 金欣口服液对RSV肺炎的作用分析 |
| 2.1 金欣口服液抗RSV的研究 |
| 2.2 金欣口服液对大鼠一般情况的影响 ) |
| 2.3 金欣口服液对大鼠体重、体温及摄食量的影响 |
| 2.4 金欣口服液作用后的大鼠病理结果分析 ) |
| 2.5 各组大鼠血清IL-6、IL-8、IL-12的表达变化分析 |
| 3. 创新与意义 |
| 4. 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 学术成果 |
| 致谢 |
（6）清肺口服液对RSV感染人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BBmRNA基因表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 祖国医学对小儿肺炎的认识 |
| 1.对肺炎证候的认识 |
| 2.对肺炎病因和病理生理的认识 |
| 3.对肺炎辨证的认识 |
| 4.对肺炎治则治法的认识 |
| 4.1 清热解毒法 |
| 4.2 化痰止咳法 |
| 4.3 活血化瘀法 |
| 4.4 扶正祛邪法 |
| 5.给药途径 |
| 5.1 静脉给药 |
| 5.2 雾化吸入 |
| 5.3 直肠给药 |
| 5.4 中药外敷 |
| 5.5 中药内外合治法 |
| 6.中药治疗呼吸道合胞病毒肺炎的实验研究进展 |
| 6.1 单味药 |
| 6.2 复方制剂 |
| 6.3 中西药结合 |
| 现代医学对呼吸道合胞病毒肺炎的研究进展 |
| 1.白细胞介素 |
| 1.1 白细胞介素-1 |
| 1.2 白细胞介素-2 |
| 1.3 白细胞介素-4及白细胞介素-5 |
| 1.4 白细胞介素-6及白细胞介素-8 |
| 1.5 白细胞介素-13 |
| 2.肿瘤坏死因子 |
| 3.细胞间粘附分子-1 |
| 4.抗病毒药物 |
| 4.1 利巴韦林 |
| 4.2 干扰素 |
| 5.免疫球蛋白 |
| 5.1 丙种球蛋白 |
| 5.2 呼吸道合胞病毒免疫球蛋白 |
| 5.3 RSV-单克隆抗体 |
| 6.辅助药物 |
| 6.1 皮质类固醇 |
| 6.2 氨溴索 |
| 6.3 支气管扩张剂 |
| 6.4 酚妥拉明 |
| 6.5 山莨菪碱 |
| 方药讨论 |
| 实验研究 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.方法 |
| 结果 |
| 3.1 清肺口服液和利巴韦林含药血清对细胞最大无毒浓度结果 |
| 3.2 RSV组织培养半数感染量(TCID_(50)) |
| 3.3 清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒的抑制作用结果 |
| 3.4 细胞总RNA质量及纯度检验 |
| 3.5 药物处理后RSV感染的HELF细胞TGF-β1与PDGF-BB的mRNA表达变化 |
| 讨论 |
| 1.实验依据 |
| 1.1 细胞培养 |
| 1.2 Hep-2及HELF的使用依据 |
| 1.3 血清药理学的研究 |
| 1.4 实时荧光定量PCR技术 |
| 1.5 转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB) |
| 2.结论 |
| 3.展望 |
| 参考文献 |
| 附录:缩略语 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（7）金欣口服液对RSV肺炎SD幼大鼠血清肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-10的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 绪论 |
| 第一部分 中医药治疗小儿病毒性肺炎研究现状 |
| 1. 中医文献的研究概述 |
| 1.1 病因病机 |
| 1.2 辨证论治 |
| 1.3 基本方加减治疗 |
| 2. 中医药抗RSV的实验研究进展 |
| 2.1 中医药抗RSV的体外抑制作用 |
| 2.2 体内试验对细胞因子影响 |
| 第二部分 肺炎的现代医学研究 |
| 1. 肺炎的病原学简介 |
| 2. RSV简介 |
| 3. 细胞因子的概述 |
| 4. 机体炎症反应与细胞因子的关系 |
| 4.1 病毒入侵对机体细胞因子的影响 |
| 4.2 促炎症反应细胞因子——肿瘤坏死因子-α的研究进展 |
| 4.3 抗炎症反应细胞因子——白细胞介素-10的研究进展 |
| 5. 展望 |
| 第三部分 金欣口服液治疗RSV肺炎的动物实验研究 |
| 1. 实验思路 |
| 2. 实验材料 |
| 2.1 实验生物 |
| 2.2 实验药物 |
| 2.3 实验试剂 |
| 2.4 实验仪器 |
| 2.5 主要药品制备 |
| 3. 具体实验步骤 |
| 3.1 人喉癌上皮细胞的培养 |
| 3.2 RSV的扩增 |
| 3.3 RSV组织培养半数感染量(50percent Tissue Culture Infective Dose)TCID_(50)的测定 |
| 3.4 金欣口服液对RSV肺炎幼大鼠血清肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-10的免疫调节作用 |
| 4. 结果 |
| 4.1 TCID50的测定 |
| 4.2 实验观察结果 |
| 4.3 ELISA法检测血清中细胞因子IL-10和TNF-α |
| 讨论 |
| 1. 金欣口服液简介 |
| 2. 金欣口服液试验研究 |
| 2.1 抗病毒作用 |
| 2.2 调节机体免疫功能的作用 |
| 2.3 解热、止咳、化痰作用 |
| 2.4 抑菌作用 |
| 2.5 病理研究 |
| 3. 实验结果分析 |
| 结论 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 学术成果 |
| 致谢 |
（8）金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠Ⅰ型干扰素表达调节作用的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 绪论 |
| 第一部分 中医文献研究 |
| 1.肺炎喘嗽中医医史文献研究 |
| 1.1 病因病机 |
| 1.2 治则治法 |
| 1.3 选方用药 |
| 2.肺炎喘嗽之现代中医研究 |
| 2.1 病因病机 |
| 2.2 治疗 |
| 第二部分 现代医学研究 |
| 1.现代医学对RSV肺炎的研究进展 |
| 1.1 病原学研究 |
| 1.2 流行病学研究 |
| 1.3 病理及发病机制 |
| 1.4 对因及对症治疗 |
| 2.中医药抗RSV病毒性的实验研究进展 |
| 2.1 体外实验研究 |
| 2.2 体内实验研究 |
| 3.构建RSV肺炎模型的实验研究进展 |
| 第三部分 实验研究 |
| 1.实验思路 |
| 2.材料和方法 |
| 3.具体实验步骤 |
| 第四部分 讨论 |
| 1.金欣口服液抗病毒性肺炎研究 |
| 1.1 金欣口服液抗病毒性肺炎研究成果与进展 |
| 1.2 金欣口服液组方药物研究 |
| 2.RSV肺炎动物造模 |
| 3.金欣口服液对RSV肺炎大鼠体内Ⅰ型干扰素的免疫调节 |
| 3.1 实验过程与造模结果分析 |
| 3.2 ELISA检测实验各组大鼠体内Ⅰ型干扰素的表达 |
| 4. 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 学术成果 |
| 致谢 |
（9）金欣口服液拮抗呼吸道合胞病毒影响细胞早期凋亡的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 绪论 |
| 第一部分 中医文献研究 |
| 1. 肺炎喘嗽之古代文献记载 |
| 1.1 相关症状记载 |
| 1.2 相关病因病机记载 |
| 1.3 治法方药 |
| 2. 肺炎喘嗽之现代中医研究 |
| 2.1 病因病机及辨证 |
| 2.2 治疗 |
| 第二部分 现代医学研究 |
| 1. 呼吸道合胞病毒入侵机体与细胞凋亡的关系 |
| 1.1 呼吸道合胞病毒入侵机体的原理及途径 |
| 1.2 呼吸道合胞病毒与细胞凋亡 |
| 2. 现代医学对 RSV肺炎的研究进展 |
| 2.1 病原学研究 |
| 2.2 病理改变 |
| 2.3 治疗 |
| 第三部分 实验研究 |
| 1. 实验思路 |
| 2. 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 3. 结果 |
| 3.1 金欣口服液含药血清、利巴韦林含药血清及空白血清对细胞最大无毒浓度测定 |
| 3.2 呼吸道合胞病毒组织培养半数感染量的测定 |
| 3.3 倒置显微镜观察各组细胞受病毒攻击后形态改变 |
| 3.4 流式细胞术检测细胞凋亡率 |
| 3.5 流式细胞术检测宿主细胞Bcl-2、Bax表达 |
| 3.6 RealTime-PCR法检测宿主细胞Bcl-2、Bax mRNA的表达 |
| 讨论 |
| 1. 金欣口服液组方药物研究 |
| 2. 实验方法的选择 |
| 2.1 HELF、HEP-2细胞的使用依据 |
| 2.2 血清药理学研究 |
| 2.3 流式细胞术 |
| 2.4 RealTime-PCR |
| 3. 结论 |
| 4. 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（10）清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎痰热闭肺证的临床及免疫机理研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1. 中医学对病毒性肺炎的认识 |
| 1.1 中医病名探讨 |
| 1.2 中医病因病机及证治规律研究 |
| 1.3 中医治则治法研究 |
| 1.4 中医药抗RSV疗效机制实验研究 |
| 2. 西医学治疗呼吸道合胞病毒肺炎进展 |
| 2.1 抗病毒化学药物 |
| 2.2 人工免疫制剂 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1. 研究思路 |
| 2. 临床试验方案 |
| 2.1 临床病例选择 |
| 2.2 临床研究方法 |
| 2.3 统计分析方法 |
| 3. 临床研究结果及分析 |
| 3.1 人口学及其他基线特征 |
| 3.2 两组受试者依从性报告 |
| 3.3 疗效指标观察结果 |
| 4. 结论 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 中医药治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎优势明显 |
| 5.2 清肺口服液是呼吸道合胞病毒肺炎痰热闭肺证有效治疗药物 |
| 5.3 主要疗效指标观察结果分析 |
| 5.4 呼吸道合胞病肺炎研究展望 |
| 第三部分 实验研究 |
| 1.实验思路 |
| 2. 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 方法与步骤 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 含药血清和含利巴韦林血清对细胞最大无毒浓度测定 |
| 3.2 RSV组织培养半数感染量 |
| 3.3 细胞总RNA质量及纯度检验 |
| 3.4 RSV感染的HELF细胞药物处理后TGF-β1与PDGF-BB的mRNA表达变化 |
| 4. 结论 |
| 5. 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录: 缩略语 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
四、开肺化痰解毒法对人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响（论文参考文献）
- [1]基于MAPKs信号通路研究黄芩苷对脂多糖所致HBE16细胞粘液高分泌的干预机制[D]. 王怡恬. 成都中医药大学, 2019(04)
- [2]清肺口服液对RSV感染小鼠Treg/Th17及IL-2和IL-17水平的影响[D]. 胡婵婵. 南京中医药大学, 2017(07)
- [3]基于TGF-β1/Smads和ERK通路cross-talk研究新风胶囊改善AA大鼠肺功能的机理[D]. 万磊. 湖北中医药大学, 2013(08)
- [4]金欣口服液对RSV诱导的TLR7信号转导通路的作用研究[D]. 戴启刚. 南京中医药大学, 2013(05)
- [5]金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠血清白介素6、8、12作用的实验研究[D]. 夏晨. 南京中医药大学, 2011(07)
- [6]清肺口服液对RSV感染人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BBmRNA基因表达的影响[D]. 吴琴琴. 南京中医药大学, 2010(04)
- [7]金欣口服液对RSV肺炎SD幼大鼠血清肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-10的影响[D]. 周娣. 南京中医药大学, 2010(04)
- [8]金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠Ⅰ型干扰素表达调节作用的实验研究[D]. 张沛. 南京中医药大学, 2010(04)
- [9]金欣口服液拮抗呼吸道合胞病毒影响细胞早期凋亡的实验研究[D]. 胡钰. 南京中医药大学, 2009(05)
- [10]清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎痰热闭肺证的临床及免疫机理研究[D]. 赵长江. 南京中医药大学, 2009(05)