一、雷公藤双层片对急性炎症抗炎作用的实验研究（论文文献综述）
王媛媛[1]（2021）在《复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及炎症反应的影响》文中研究说明目的:本实验研究旨在从炎症反应角度,观察复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠24h-UPr、肾功能与部分肝功能生化指标及IL-6、TGF-β1的影响,为探究复方青龙衣胶囊治疗阿霉素肾病大鼠蛋白尿的可行性,为探讨该药物新的功效提供理论依据。方法:实验选取6周龄清洁级雄性SD大鼠72只,适应性饲养一周后,先按照大鼠的体重随机分为两组,分别为空白组（n=12）与造模组（n=60）。按照Bertani方法,造模组大鼠按6.5mg/kg体重的剂量,利用一次性尾静脉注射阿霉素溶液的方法建立模型。以造模鼠24h-UPr≥10mg且有统计学意义作为造模成功判定标准。将造模成功且存活的大鼠随机分为四组,即复方青龙衣组（青龙衣组）、雷公藤多苷片组（雷公藤组）、盐酸贝那普利片组（洛汀新组）、模型对照组（模型组）。每日按时观测并记录各组大鼠一般状态及相关数据。造模成功后第1、2、4周末,测定大鼠24h-UPr。在第4周末,将大鼠腹腔注射10%的水合氯醛溶液,麻醉后心脏取血,检测Scr、BUN、TC、ALB、ALT与AST。将肾脏组织呈冠状面切开,一部分在冰水浴条件下,用匀浆器制备成10%的组织匀浆;另一部分放入2.5%戊二醛中固定,以备电镜观察肾组织结构改变;免疫组化染色法分析肾组织IL-6、TGF-β1定位与表达;PCR检测法测定肾组织IL-6、TGF-β1含量。结果:1.青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠24h-UPr较模型组均降低（P<0.05）;青龙衣组大鼠,与洛汀新组比较24h-UPr明显降低（P<0.05）,与雷公藤组比较24h-UPr无明显差异（P>0.05）;2.青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠TC值较模型组均降低,青龙衣组明显降低（P<0.05）;青龙衣组大鼠与雷公藤组、洛汀新组比较,TC值明显降低（P<0.05）。青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠ALB值较模型组均升高,青龙衣组升高最为明显（P<0.05）;青龙衣组大鼠与雷公藤组、洛汀新组比较,ALB值明显升高（P<0.05）;3.青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠肾组织中IL-6、TGF-β1的表达与定量较模型组均降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;4.透射电镜结果显示:青龙衣组、雷公藤组大鼠肾小球足细胞足突融合甚至消失程度明显减轻。结论:1.复方青龙衣胶囊可以有效降低阿霉素肾病大鼠24h-UPr及血清TC含量,升高血清ALB含量,减缓进一步肾脏损伤程度,从而延缓肾脏疾病的发展,发挥一定的肾脏保护作用;2.复方青龙衣胶囊可能通过降低IL-6、TGF-β1的表达与定量,减轻肾脏炎症反应的损伤,从而抑制蛋白尿。
郭晓媛[2]（2021）在《滋肾丸干预糖尿病肾病肾小管上皮细胞焦亡作用及机制研究》文中提出[目的]探究滋肾丸（ZiShenWan,ZSW）对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）肾小管上皮细胞焦亡的干预作用及机制,通过网络药理学研究分析ZSW治疗DN的靶点及通路,为ZSW治疗DN提供科学依据。[方法]1.动物实验:采取随机对照方法,将雄性6周龄db/db小鼠分为模型组、阳性对照组、ZSW高剂量组、ZSW中剂量组、ZSW低剂量组（n=10）;非糖尿病db/m小鼠为正常对照组（n=10）。适应性喂养2周后,ZSW各剂量组给予ZSW乙醇提取物灌胃（高剂量:6.0g/kg;中剂量:3.0g/kg;低剂量:1.5 g/kg）;阳性对照组给予达格列净灌胃（1.0mg/kg）;模型组和正常对照组同时给予等体积去离子水灌胃。每天灌胃1次,持续12周。每2周检测体重、尾静脉FBG;每4周检测尿液ACR、NAG酶、NGAL和CysC;给药12周后摘眼球取血,称量右肾脏重量,固定或冻存肾组织。血清检测HbA1c、BUN和CRE。肾组织经HE染色、PAS染色、Masson染色后光镜观察组织病理学改变,透射电镜观察超微结构改变,进行病理半定量评分;免疫组化染色观察分析肾小管上皮细胞上皮—间充质转化（EMT）标志物α-SMA和E-cadherin的表达强度;TUNEL染色观察分析肾小管上皮细胞核的损伤水平;Western blot及RT-qPCR分别检测NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1以及焦亡相关炎症因子IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18的蛋白及mRNA表达水平。2.细胞实验:正常人近端肾小管上皮细胞（HK-2）进行复苏、传代及培养。通过MTT法检测细胞增殖活力筛选细胞培养条件及药物干预剂量,以高渗葡萄糖（45μmol/L）培养HK-2细胞48 h诱导焦亡及EMT,分为高糖组、ZSW低剂量组、ZWS中剂量组、ZSW高剂量组、阳性对照组。ZSW各剂量组给予ZSW乙醇提取物干预（高剂量:15μg/ml;中剂量:7.5μg/ml;低剂量:3.75μg/ml）;阳性对照组给予达格列净干预（0.1μmol/L）。另设空白组为正常对照、甘露醇组为高渗对照。光镜观察细胞形态改变;Transwell试验检测细胞迁移能力;TUNEL染色评估细胞核的损伤、LDH试验评估细胞膜的损伤、Annexin V/PI双染检测细胞焦亡水平;ELISA检测细胞上清液IL-1β、IL-18水平;Western blot 及 RT-qPCR 分别检测细胞 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、cleaved IL-1 β、IL-18的蛋白及mRNA表达水平。3.网络药理学:通过检索数据库筛选ZSW的药物活性成分和DN的疾病靶点,获得ZSW治疗DN的作用靶点;应用Cytoscape软件构建ZSW治疗DN的“药物—成分—靶点”网络,应用STRING数据库构建ZSW治疗DN的关键靶点的PPI网络,筛选ZSW治疗DN的核心关键靶点;应用Cytoscape软件和DAVID数据库进行基因功能和通路分析。[结果]1.动物实验:（1）药效学:与正常对照组相比,模型组FBG、HbAlc、BUN、血CRE及尿ACR、NAG酶、NGAL、CysC显着升高（P<0.01）。经ZSW干预后上述指标均显着降低（P<0.01）。（2）肾组织病理学:模型组肾小球出现体积增大、基底膜不均匀增厚、系膜基质增生;肾小管出现上皮细胞空泡变性、炎性细胞浸润;胶原纤维染色面积、基底膜厚度、肾小管损伤指数显着升高（P<0.01）。ZSW不同程度减轻上述病理改变,显着降低病理半定量评分（P<0.01）。（3）肾小管上皮细胞EMT:与正常对照组相比,模型组肾小管上皮细胞α-SMA表达强度、肾组织α-SMA蛋白及mRNA表达显着升高;肾小管上皮细胞E-cadherin表达强度、肾组织E-cadherin蛋白及mRNA表达显着降低（P<0.01）。ZSW显着改变肾小管上皮细胞α-SMA和E-cadherin表达强度,不同程度降低肾组织α-SMA蛋白及mRNA表达、升高肾组织E-cadherin的蛋白及mRNA表达（P<0.05或P<0.01）。（4）肾小管上皮细胞焦亡:与正常对照组相比,模型组肾小管上皮细胞核碎裂增多,TUNEL染色阳性率显着升高,肾组织IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）。ZSW减轻肾小管上皮细胞核碎裂,显着降低细胞TUNEL染色阳性率,显着降低肾组织IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18蛋白及mRNA表达（P<0.01）。（5）肾组织NLRP3炎症小体活化:与正常对照组相比,模型组肾组织NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）,ZSW不同程度降低上述指标的蛋白表达（P<0.05或P<0.01）,显着降低NLRP3、ASC mRNA表达（P<0.01）,高剂量ZSW显着降低Caspase-1 mRNA表达（P<0.01）。2.细胞实验:（1）EMT:高糖培养使HK-2细胞形态发生间质细胞样改变,迁移能力显着增强,α-SMA蛋白及mRNA表达显着升高,E-cadherin蛋白及mRNA表达显着降低（P<0.01）;ZSW抑制高糖诱导的HK-2细胞的间质样改变,显着降低细胞迁移能力,显着降低α-SMA蛋白及mRNA表达,不同程度升高E-cadherin蛋白及mRNA表达（P<0.05或P<0.01）。（2）焦亡:高糖培养使HK-2细胞的细胞核及细胞膜损伤加重,焦亡水平升高,IL-1β、IL-18释放增加,IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）;ZSW明显减轻细胞核及细胞膜损伤,显着降低焦亡水平,显着减少IL-1β、IL-18释放以及 IL-1β、cleaved IL-1β 和 IL-18 蛋白及 mRNA 表达（P<0.01）。（3）NLRP3炎症小体活化:高糖培养使HK-2细胞NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）;ZSW不同程度降低上述指标的蛋白及mRNA表达（P<0.05 或 P<0.01）。3.网络药理学:经筛选获得ZSW的56个有效活性成分,与数据库中DN的疾病靶点映射获得166个ZSW治疗DN的靶点,与51个ZSW的有效活性成分共同构建“药物—成分—靶点”网络,通过PPI网络筛选获得154个关键核心靶点,诸多靶点涉及炎症反应相关,主要富集在钙通道复合体、膜区、突触和细胞质等细胞组分;G蛋白偶联受体活性、神经递质结合等分子功能;脂多糖介导的信号通路、氧化还原、突触传递等生物学过程;包含NOD样受体（NLR）信号通路在内的炎症反应、晚期糖基化终末产物、细胞增殖分化、内分泌抵抗、神经组织传导等相关信号通路。[结论]1.ZSW有效降低db/db小鼠血糖,减少尿蛋白,改善肾小管早期损伤指标及肾功能,减轻肾组织病理损伤,抑制肾小管上皮EMT及焦亡,可能是通过抑制NLRP3炎症小体活化实现的。2.ZSW有效抑制高糖诱导的HK-2细胞EMT及焦亡,可能是通过抑制NLRP3炎症小体活化实现的。3.ZSW中的多种有效成分多靶点、多通路治疗DN,干预炎症反应是ZSW治疗DN的重要作用机制。
赖德培（Thanakorn Theerakarunwong）[3]（2020）在《督脉排针法联合通痹灵片治疗强直性脊柱炎的临床研究》文中提出目的:通过随机、对照、前瞻性试验,以常规针刺联合通痹灵片、督脉排针法、口服通痹灵片为对照组,观察督脉排针法联合通痹灵片治疗强直性脊柱炎的临床有效性和安全性以及对生存质量影响,为中医综合治疗强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）提供临床证据,有利于中医药疗法在中泰两国乃至国际的推广与传播。方法:1.采用随机对照的临床研究方法,将符合纳排标准的强直性脊柱炎患者随机分为4组,治疗组采用督脉排针法联合通痹灵片,对照1组采用常规针刺联合通痹灵片,对照2组采用督脉排针法,对照3组采用口服通痹灵片,疗程均为4周,共28天。分别于治疗前后观察AS患者实验室指标（ESR、CRP、TNF-α）、脊柱痛VAS评分、患者总体评价VAS评分（PGA）、Bath强直性脊柱炎疾病活动指数（BASDAI）、Bath强直性脊柱炎功能指数（BASFI）、Bath强直性脊柱炎测量学指数（BASMI）、中医证候积分评分、强直性脊柱炎生活质量评价量表（ASQo L）等比较各组临床疗效及不良反应。2.统计:采用SPSS 22.0软件包进行数据统计分析,采用?2检验、方差分析（正态性分布）或秩和检验（非正态性分布）,检验水准均设为α=0.05,P≤0.05认为差异有统计学意义。结果:1.本研究纳入自2019年2月至2020年3月在广州中医药大学第一附属医院针灸科及风湿科、泰国那空拉差是玛府直辖县呵叻大学附属荫达宁中医诊所符合标准的AS患者共132例,其中共脱落9例,有效病例为123例,其中治疗组31例,对照1组30例,对照2组32例,对照3组30例。2.基线4组患者治疗前在性别、年龄、病程、实验室指标（ESR、CRP、TNF-α）、中医证候积分评分、脊柱痛VAS评分、病人总体评价（PGA）、BASFI评分、BASDAI评分、BASMI评分、ASQo L、等指标各方面比较,差异无统计学意义（P>0.05）,具有可比性。3.临床疗效方面治疗结束后,4组均未出现临床痊愈,治疗组显效15例,有效14例,无效2例,总有效率为93.55%。对照1组显效2例,有效21例,无效7例,总有效率为76.67%。对照2组显效0例,有效19例,无效13例,总有效率为59.38%。对照3组显效0例,有效20例,无效10例,总有效率为66.67%。4组有效率比较,差异有统计学意义（P<0.05）。4.实验室检查指标方面（1）红细胞沉降率（ESR）方面,组内比较,4组治疗前后ESR均有所下降,但在治疗期间均未降至正常值,差异有统计学意义（P<0.05）。组间比较,与治疗组治疗后对比,督脉排针法联合通痹灵片与督脉排针法针刺、通痹灵片口服之间,有统计学差异（P<0.05）。对照1组、对照2组、对照3组与治疗组治疗前后差值比较,对照1组治疗前后差值与对照3组间比较,有统计学差异（P<0.05）。（2）C反应蛋白（CRP）方面,组内比较,4组CRP治疗前后均有所下降,但在治疗期间均未降至正常值,差异有统计学意义（P<0.05）。组间比较,与治疗组治疗后对比,督脉排针法联合通痹灵片与其余三组对照组之间,常规针刺联合通痹灵片治疗后与通痹灵片口服对比,对照1组、对照2组、对照3组与治疗组治疗前后差值比较,对照1组治疗前后差值与对照3组相比,有统计学差异（P<0.05）。（3）肿瘤坏死因子-α（TNF-α）方面,组内比较,4组治疗前后TNF-α均有所下降,但在治疗期间均未降至正常值,差异有统计学意义（P<0.05）。组间比较,常规针刺联合通痹灵片治疗后与通痹灵片口服相比,有统计学差异（P<0.05）。治疗组治疗前后差值与对照2组、对照3组与比较,有统计学差异（P<0.05）;对照1组治疗前后差值与对照3组相比,有统计学差异（P<0.05）。5.脊柱痛VAS与病人总体评价（PGA）方面（1）在脊柱痛VAS评分方面,四组治疗前后组内比较,差异有统计学意义（P<0.05）。与治疗组治疗后进行组间对比,督脉排针法联合通痹灵片与常规针刺联合通痹灵片、通痹灵片口服之间,有统计学差异（P<0.05）。对照1组、对照2组、对照3组与治疗组治疗前后差值比较,均有统计学差异（P<0.05）。（2）在病人总体评价（PGA）方面,四组治疗前后组内比较,差异有统计学意义（P<0.05）。三组对照组与治疗组治疗后、治疗前后差值对比发现,督脉排针法联合通痹灵片与通痹灵片口服之间,有统计学差异（P<0.05）。6.AS相关量表评分方面（1）在强直性脊柱炎疾病活动性指数（BASDAI）方面、强直性脊柱炎疾病功能指数（BASFI）方面、强直性脊柱炎疾病测量学指数（BASMI）方面,四组治疗前后组内比较,差异有统计学意义（P<0.05）。三组对照组与治疗组治疗后、治疗前后差值对比发现,督脉排针法联合通痹灵片与常规针刺联合通痹灵片、督脉排针法针刺、通痹灵片口服之间,有统计学差异（P<0.05）。（2）在强直性脊柱炎生活质量评价量表（ASQo L）方面,四组治疗前后组内比较,督脉排针法联合通痹灵片、常规针刺联合通痹灵片、督脉排针法针刺均有统计学差异（P<0.05）。督脉排针法联合通痹灵片与督脉排针法针刺之间,有统计学差异（P<0.05）。7.中医证候积分方面四组治疗前后组内比较,在关节肿胀、腰脊活动受限、关节疼痛、肢体困重、腰膝酸软、发热汗出、中医证候积分总分评分方面,差异有统计学意义（P<0.05）。三组对照组与治疗组治疗后进行对比,在缓解关节肿胀程度方面,督脉排针法联合通痹灵片与常规针刺联合通痹灵片有统计学差异（P<0.05）。在改善腰脊活动受限、关节疼痛、肢体困重、腰膝酸软、发热汗出、中医证候积分总分方面,督脉排针法联合通痹灵片与其余三组对照组有统计学差异（P<0.05）。结论:1.在督脉排针法联合通痹灵片治疗AS中,督脉排针能有效改善炎症指标ESR、CRP、TNF-α,其中对降低ESR水平疗效更为显着;可缓解脊柱及关节等躯体疼痛;能改善活动功能障碍。2.通痹灵片口服能降低炎症因子ESR、CRP、TNF-α的水平,能有效改善活动功能障碍,且能有效缓解脊柱疼痛,但单纯口服通痹灵片对缓解躯体疼痛效果不明显。3.常规针刺在治疗AS中,针刺能有效降低炎症因子ESR、CRP、TNF-α,但与督脉排针相比,督脉排针法对降低ESR更明显,常规针刺对缓解疼痛、改善活动功能障碍疗效不显着。综上所述,督脉排针法联合通痹灵片治疗AS可降低炎症因子水平、缓解关节肿胀疼痛等症状、改善AS患者活动功能;较单一疗法疗效更显着,能整体改善AS患者的症状、体征。该疗法操作安全性高,临床应用性广,患者经济负担小,有利于提高患者依从性,更有效地控制疾病进程、改善AS患者的生活质量,值得进一步推广运用。
原文娜[4]（2020）在《逍遥散和逍遥散简化方对雷公藤肝毒性解毒作用的比较研究》文中研究表明目的:对逍遥散和逍遥散简化方减轻雷公藤肝毒性疗效的进行比较,并进一步研究减轻雷公藤肝毒性的机制。方法:1.雷公藤模型的制备:按随机数表法将20只SD大鼠分为空白组和模型组各10只,空白组用生理盐水灌胃,模型组灌服生药量为2g/ml的雷公藤水煎剂,持续4周,每周称量体重并记录,同时在第2周和第4周时分别进行眼眶取血,检测ALT和AST的水平,比较在第几周时造成明显的雷公藤肝毒性。2.逍遥散和逍遥散简化方减轻雷公藤肝毒性疗效的比较:按随机数表法将60只SD大鼠分为空白组、模型组、逍遥散组、简化方组和甘利欣组,各12只,除空白组以生理盐水灌胃外,其余组灌服雷公藤水煎剂,持续4周。之后空白组和雷公藤组灌服生理盐水,其余组灌服相应的治疗药物。在灌胃结束第一天后,对实验动物进行取材,取腹主动脉血清测量肝功能指标ALT和AST,与氧化有关的指标GSH-PX、SOD和MDA,并称量大鼠的肝重以计算肝脏的指数。取肝脏同一部分放入固定液中制成病理切片,观察病理损伤程度。3.基于VEGF信号通路研究逍遥散对雷公藤肝毒性的解毒机制:ELISA法检测血清中VEGF的含量,取右侧下丘脑放入固定液中制作病理切片,Western Blot法测定肝组织中VEGF、BDNF、p-ERK2的蛋白表达水平。结果:1.与空白组相比,雷公藤组的体重降低明显（P<0.05）。模型组在第2周和第4周时ALT和AST均升高,但第4周时雷公藤造成的肝毒性更加明显。2.与空白组相比,雷公藤组ALT和AST水平升高明显（P<0.01）;与雷公藤组比较,逍遥散组、简化方组和甘利欣组的ALT和AST水平明显降低（P<0.01）。而与空白组比较MDA含量,雷公藤组的水平升高明显（P<0.05）;与雷公藤组相比,逍遥散组、简化方组和甘利欣组的水平显着的降低（P<0.05）。在SOD和GSH-PX的含量方面,模型组比空白组的含量少（P<0.01）。与雷公藤组相比,逍遥散组水平增加明显（P<0.01）。雷公藤组的肝指数较空白组显着增加（P<0.01）;而与雷公藤组相比,逍遥散组、简化方组和甘利欣组肝脏指数显着下降（P<0.01）。雷公藤组病理切片出现炎性细胞浸润,逍遥散组和甘利欣组肝细胞大致正常。3.模型组的VEGF水平比空白组高,而逍遥散组和甘利欣组与模型组相比,VEGF的水平降低明显。Western Blot结果表明,模型组的BDNF蛋白表达水平下降,而p-ERK2和VEGF的蛋白表达水平增加,而与模型组相比,逍遥散组、简化方组和甘利欣组的p-ERK2和VEGF的蛋白表达水平下降。下丘脑的病理切片显示,模型组下丘脑胶质细胞增生活跃,细胞轻度异型性,逍遥散组胶质细胞退变,细胞形态大致正常,简化方组和甘利欣组神经组织未见明显异常。结论:雷公藤按生药量为2g/ml时,连续灌服4周能造成肝毒性模型。而逍遥散和简化方均具有保肝作用,其中对于减轻雷公藤肝毒性的作用,发现以逍遥散的疗效最佳,不管是降低ALT和AST水平,还是提高抗氧化水平。而逍遥散减轻雷公藤的肝毒性机理可能与抑制VEGF信号通路有关。
管斯琪[5]（2020）在《补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究》文中研究说明目的人类生育力逐年降低已经成为影响发展的医学和社会学问题,男性因素导致的不孕不育占了 40%-50%,其中少弱精子症是男性不育症最常见的病因之一。对于特发性精液异常,西药治疗效果欠佳,手术治疗的应用范围存在一定局限性,而中医药具有较好的疗效。菟枸助育汤是在五子衍宗丸的基础上加减化裁而来,临床用于治疗少弱精子症逾20年,但目前尚无相关的研究。故本研究设计临床试验,观察评价菟枸助育汤对男性不育少弱精子症患者的临床疗效,并设计动物实验探究菟枸助育汤的核心药对“菟丝子-枸杞子”对生精功能障碍模型大鼠生精功能的影响,并对其具体的作用机制进行探讨。方法临床研究:收集男性不育少弱精子症76例,采用无病例对照研究的方法,观察菟枸助育汤对少精子症和弱精子症受试者精液质量（包括精液液化状态、精液量、精子活动率、精子浓度和总数等指标）和中医证候评分的干预作用。入组时,采集所有受试者的一般信息、病史、合并用药、体格检查等相关资料。研究第1天起每日给予入组的受试者菟枸助育汤中药免煎颗粒治疗,疗程共90天,分别于第0、30、60、90天各进行一次访视,记录受试者的精液常规结果和中医证候评分,同时进行安全性观察,记录各类不良事件,填写病例报告表,每次访视时严格进行脱落、剔除的评估,最后统计所有数据。实验研究:1.将78只SD大鼠随机分为空白对照组（NC组）、模型对照组（GTW组）、左卡尼汀组（GTW+LEV组）、菟丝子-枸杞子药对组（GTW+SCFL组）和药对+抑制剂组（LY+SCFL组）。2.除NC组以外,其余各组用雷公藤多苷（40mg/kg）灌胃4周,建立生精功能障碍模型。3.第5周起GTW+LEV组（予10ml/kg左卡尼汀灌胃）、GTW+SCFL组（予菟丝子-枸杞子中药液灌胃）和LY+SCFL组（予菟丝子-枸杞子中药液灌胃）每日分别予以相应药物干预,LY+SCFL组于第1周起每周1次尾静脉注射PI3K抑制剂。4.实验8周后测定各组大鼠精子质量、附睾/睾丸脏器系数,检测性激素、抑制素B、附睾肉毒碱的水平,光镜下和透射电镜下观察睾丸的组织病理形态和细胞的超微结构,用免疫组化法、western blot以及Real-Time PCR技术检测大鼠睾丸组织SCF、c-kit、PI3K、p-Akt、Bad、Bcl-2 和 Bax 蛋白及 mRNA 的表达。结果临床研究:本研究共完成临床病例76例,纳入研究的男性不育少精子症和弱精子症患者经过菟枸助育汤治疗后,总体的精液质量中液化状态、PR精子百分比、PR+NP精子百分比、精子浓度和精子总数等疗效性指标显着改善,具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;中医证候评分随着治疗进行有了明显的下降（P<0.05或P<0.01）;疗效判定为“痊愈”的11例,“显效”29例,“有效”32例,“无效”4例,总有效率为94.74%。整个观察期间脱落病例4例,无剔除病例,未见任何不良反应报告。实验研究:经菟丝子-枸杞子干预后的GTW+SCFL组与GTW组相比,大鼠的一般状态、附睾脏器系数、精子质量、卵泡生成素（FSH）、黄体生成素（LH）、泌乳素（PRL）和附睾肉毒碱均有显着的改善,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;睾丸组织病理形态及细胞的超微结构观察发现,GTW+SCFL组与GTW组比较,生精小管结构、排列较正常,生精细胞明显增多,形态改善,内含的线粒体等细胞器增多;免疫组化、western blot和Real-Time PCR结果显示,与GTW组比较,GTW+SCFL组大鼠睾丸SCF、c-kit、PI3K、p-Akt和Bcl-2蛋白含量升高,Bax、Bad蛋白表达下降（P<0.05或P<0.01）;LY+SCFL组与GTW+SCFL组相比,SCF、c-kit和PI3K的表达无明显差异,p-Akt和Bcl-2表达减少,Bad和Bax的蛋白表达增加（p<0.05或P<0.01）。结论1.菟枸助育汤在改善男性不育少弱精子症患者的精液参数和肾虚证候中医评分方面疗效显着,能提高患者的生精功能。2.菟枸助育汤中的核心药对“菟丝子-枸杞子”可以改善生精功能障碍模型大鼠一般状态、附睾脏器系数、精子质量、FSH、LH、PRL和附睾肉毒碱,并对雷公藤多苷致睾丸组织和生精细胞的形态结构和功能的损伤具有较好的修复作用。3.“菟丝子-枸杞子”药对可以有效调控模型大鼠睾丸组织SCF、c-kit、PI3K、p-Akt、BAD、Bcl-2、Bax 蛋白及其 mRNA 的表达,通过调控 SCF/c-kit-PI3K-Bcl-2 信号通路促进生精细胞增殖和抑制生精细胞凋亡的作用。综上,菟枸助育汤可有效提高男性不育少弱精子症患者的生精功能,临床疗效显着,其作用机制可能是通过SCF/c-kit--PI3K--Bcl-2通路调控生精细胞增殖和凋亡来实现的。
刘林[6]（2019）在《基于MyD88依赖性信号通路探讨丁锷教授益气养血通络法治疗类风湿关节炎的作用机制》文中研究说明1目的观察丁锷教授益气养血通络法联合雷公藤多苷片对类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）患者的治疗疗效,及对MyD88依赖性信号通路、促炎/抑炎细胞因子及实验室指标的变化。阐明MyD88依赖性信号通路与RA的相关性,研究益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者MyD88依赖性信号通路的影响,并探讨其作用机制。2方法2.1理论探析通过大量文献检索、研究,探讨RA与中医气血亏虚、瘀血阻络之间的关系,分析阐明RA中医病因病机和内在联系,阐述益气养血通络法治疗RA的理论依据。2.2临床研究选取2017年9月-2018年5月安徽省中医院风湿科门诊与住院的40例RA患者。随机分为2组,研究组（益气养血通络方+雷公藤多苷片）和对照组（雷公藤多苷片）各20例,另从本院体检中心选20例健康体检人员作为正常对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定IL-1β、IL-10、TNF-α;荧光定量PCR检测TLR4、MyD88、TAK1、IKK、NF-KBp65;全自动生化分析仪检测hs-CRP、RF、CCP、Ig G、Ig A、Ig M、C3、C4、肝功能、肾功能等;自动血沉分析仪检测ESR;全自动血液、尿液分析仪检测血常规、尿常规,心电图机检测心电情况。计算DAS28、VAS评分、中医证候评分。采用问卷量表方式评价生活质量、HAQ、SAS、SDS变化。3结果3.1理论探析结果3.1.1 MyD88依赖性信号通路在RA发病过程中扮演重要角色。3.1.2 MyD88依赖性信号通路调控炎症因子的释放,影响RA的免疫炎症。3.1.3中医气血亏虚是RA的起病原因,且参与RA的病理演变过程。3.1.4益气养血通络法是防治RA行之有效的治疗方法。3.2临床研究结果3.2.1 RA患者血清各项指标的变化及相关性研究RA组TLR4、MyD88、TAK1、IKK、NF-KBp65、TNF-α、IL-1β水平高于正常组（P<0.05或P<0.01）,IL-10低于正常组（P<0.01）,且RA组CCP、ESR、CRP、RF明显高于正常组（P<0.01）;RA组TLR4与CRP呈正相关（P<0.05）,MyD88与CCP、DAS28呈正相关（P<0.05或P<0.01）,TAK1与RF呈正相关（P<0.05）,NF-KBp65与CCP呈正相关（P<0.05）,IKK与疾病活动度指标无明显相关性（P>0.05）;TNF-α与CCP、CRP呈正相关（P<0.05）,IL-1β与RF呈负相关（P<0.05）,与DAS28呈正相关（P<0.05）,IL-10与ESR、DAS28呈负相关（P<0.05）。TLR4与IL-10呈负相关（P<0.05）,MyD88与TNF-α呈正相关（P<0.05）,TAK1与IL-1β呈正相关（P<0.05）,NF-KBp65与IL-1β呈正相关（P<0.05）,IKK与TNF-α、IL-1β、IL-10均无相关性（P>0.05）。RA组TLR 4与关节肿胀、纳差、女性月经量少、色暗、有血块、经期延后呈正相关（P<0.05）;MyD88与劳累后加重、面色淡白或萎黄、女性月经量少、色暗、有血块、经期延后、舌暗淡、有瘀斑呈正相关（P<0.05或P<0.01）;TAK1与关节肿胀、气短乏力、纳差、自汗、女性月经量少、色暗、有血块、经期延后呈正相关（P<0.05或P<0.01）;IKK与关节疼痛、晨僵、气短乏力、脉细涩无力呈正相关（P<0.05）;NF-KBp65与关节压痛、面色淡白或萎黄呈正相关（P<0.05）。TNF-α与关节肿胀、晨僵、劳累后加重、纳差、舌暗淡、有瘀斑呈正相关（P<0.05）;IL-1β与关节疼痛、气短乏力、面色淡白或萎黄、女性月经量少、色暗、有血块、经期延后呈正相关（P<0.05）;IL-10与关节压痛、自汗呈负相关（P<0.05）。RA患者TLR4与HAQ呈正相关（P<0.01）;MyD88与SAS、SDS呈正相关（P<0.05）;TAK1与生活质量呈正相关（P<0.05）;IKK与SAS、SDS呈正相关（P<0.05）;NF-KBp65与SDS呈正相关（P<0.05）。3.2.2益气养血通络法联合雷公藤多苷片治疗RA的临床疗效研究组和对照组治疗前后临床疗效比较,总有效率无明显差异（P>0.05）。但研究组治疗显效率明显高于对照组（P<0.01）。3.2.3益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者MyD88依赖性信号通路水平的影响两组治疗前TLR4、MyD88、TAK1、IKK、NF-KBp65数值差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后,研究组TLR4、MyD88、NF-KBp65明显降低（P<0.05）,对照组在降低MyD88、IKK数值上有统计学意义（P<0.05）,两组治疗后对比,两组MyD88均降低,但无明显差异（P>0.05）;研究组在降低TLR4、NF-KBp65上更具优势（P<0.05）。3.2.4益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者TNF-α、IL-1β、IL-10水平的影响两组治疗前TNF-α、IL-1β、IL-10水平无显着差异（P>0.05）。治疗后,研究组TNF-α、IL-1β均明显降低（P<0.01）,IL-10明显升高（P<0.01）,对照组IL-1β有效降低（P<0.01）,IL-10亦升高（P<0.01）。两组治疗后相比,两组均可降低IL-1β、升高IL-10,但研究组在降低IL-1β水平上不占优势（P>0.05）,研究组在降低TNF-α、升高IL-10水平方面明显优于对照组（P<0.05或P<0.01）。3.2.5益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者实验室指标的影响治疗前两组实验室各指标无显着差异（P>0.05）。治疗后,研究组CCP、ESR、CRP、RF、Ig G、Ig A、C3、C4值降低（P<0.01或P<0.05）,对照组ESR、CRP、Ig G、C3、C4亦有所降低（P<0.01或P<0.05）。两组治疗后相比,研究组在改善CCP、ESR、CRP、RF、Ig A方面更明显（P<0.05）。3.2.6益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者中医证候积分的影响治疗前两组中医证候积分无显着差异（P>0.05）。治疗后,两组在改善患者关节肿胀、疼痛、晨僵、劳累后加重方面均发挥作用（P<0.01或P<0.05）;研究组在改善关节肿胀、晨僵、气短乏力、劳累后加重、纳差、面色淡白或萎黄、自汗、女性月经量少、色暗、有血块、经期延后、舌暗淡、有瘀斑方面优于对照组（P<0.01或P<0.05）,其中研究组在改善患者气血亏虚兼瘀血阻络证表现的气短乏力、劳累后加重、纳差、面色淡白或萎黄、自汗、女性月经量少、色暗、有血块、经期延后、舌暗淡、有瘀斑方面效果显着（P<0.05或P<0.01）。3.2.7益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者DAS-28及VAS水平的影响治疗前两组DAS-28和VAS无显着差异（P>0.05）。治疗后,两组DAS-28、VAS均明显降低（P<0.05或P<0.01）;其中研究组比对照组降低DAS-28更明显（P<0.05）。3.2.8益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者生活质量相关指标的影响治疗前两组生活质量相关指标无显着差异（P>0.05）。治疗后,两组HAQ、SAS、SDS均降低（P<0.05或P<0.01）;其中在降低HAQ、SAS、SDS方面,研究组较对照组效果更明显（P<0.05或P<0.01）。4.结论4.1 RA患者MyD88依赖性信号通路各指标、炎症因子变化及其相关性分析RA患者TLR4、MyD88、TAK1、IKK、NF-KBp65、TNF-α、IL-1β较正常人高,IL-10水平较正常人低。MyD88依赖性信号通路与疾病活动度关系密切,且MyD88依赖性信号通路与炎症因子TNF-α、IL-1β呈正相关,与IL-10呈负相关;同时,通路指标、炎症因子与生活质量、健康状况、生活质量、焦虑抑郁情况及中医气血亏虚、瘀血阻络症状密切相关。4.2益气养血通络法联合雷公藤多苷片对RA患者临床疗效观察及对各指标的影响益气养血通络法联合雷公藤多苷片治疗RA疗效显着,能有效控制病情,降低疾病活动,改善患者气血亏虚、瘀血阻络的症状,降低焦虑抑郁状态,提高患者身体健康状况及生活质量。益气养血通络法联合雷公藤多苷片能有效防治雷公藤多苷片的胃肠道反应及改善女性性腺抑制状况。益气养血通络法联合雷公藤多苷片能有效降低RA患者TLR4、NF-KBp65、TNF-α水平,升高IL-10水平,降低RA患者CCP、ESR、CRP、RF、Ig A水平。4.3益气养血通络法联合雷公藤多苷片治疗RA的可能作用机制4.3.1益气养血通络法联合雷公藤多苷片通过下调TLR4、NF-KBp65的表达,以抑制MyD88依赖性信号通路过度激活,从而抑制下游炎症因子释放,降低炎症反应。4.3.2益气养血通络法联合雷公藤多苷片通过下调TNF-α,上调IL-10,抑制促炎反应,提高抑炎反应,以减轻患者免疫炎症。
杨海跃[7]（2018）在《雷公藤低毒高效部位药效、安全性评价研究》文中认为雷公藤是一种对类风湿性关节炎、肾病综合征等难治性疾病具有确切疗效的传统中药,大量研究显示雷公藤及其主要成分如二萜、三萜等成分具有广泛的药理活性,尤其在抗炎和免疫抑制作用方面。目前临床上雷公藤及其提取物制剂广泛用于治疗类风湿性关节炎、肾病综合征、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病,疗效确切,但由于雷公藤具有较大毒性使得很多患者无法坚持长期服用,顺应性差。目前市售雷公藤制剂多为雷公藤经简单提取纯化后制成的普通制剂,其化学成分复杂,药效及毒性物质基础亦不明确,质控指标选择和质量控制评价方法差别较大,致使不同厂家生产的雷公藤制剂在疗效和毒副作用方面存在较大差异,另外其毒副作用耐受问题并未有效解决,使其临床应用受限。因此,在明确雷公藤药效和主要毒性成分的基础上,通过改进提取纯化工艺,制备低毒高效的雷公藤制剂,建立稳定可靠的质量控制方法,是促进雷公藤制剂研发和保证安全用药的可行思路。本课题组前期以此为思路进行探索和研究,在建立雷公藤指纹图谱的基础上,以谱效分析为指导,明确了雷公藤的主要药效成分和毒性成分,并利用硅胶色谱法制备了多个不同药效和毒性成分比例的纯化部位。本研究在此基础上,通过体内外药效和毒性实验研究,评价课题组前期制得的雷公藤不同纯化部位的药效和毒性差异,优选低毒高效部位,并评价其抗类风湿性关节炎活性和安全性,为后续雷公藤低毒高效制剂研发和建立质量标准奠定基础。本课题体外实验研究对象为课题组前期纯化方案所得的18个纯化部位:石油醚-乙酸乙酯洗脱方案（方案A）得部位A1～A8,二氯甲烷-甲醇洗脱方案（方案B）得部位B1～B10。以市售雷公藤多苷片（江苏美通）为参照。以脂多糖（LPS）诱导小鼠脾淋巴细胞炎症模型,以TNF-α和IL-6为评价指标考察各纯化部位的体外抗炎活性;以刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠脾淋巴细胞免疫抑制模型,以IFN-y和IL-2为指标考察各纯化部位体外免疫抑制活性;以正常心肌细胞H9c2、肝细胞L-02、肾小球系膜细胞GNM-SV40考察各纯化部位的体外毒性作用。结果显示B3、B7和B10药效较强且毒性小,较符合低毒高效的要求,故选择其进行后续体内药效和毒性研究。体内实验以B3、B7和B10为研究对象,以市售雷公藤多苷片为参照。以角叉菜胶致大鼠足趾肿胀和二甲苯致小鼠耳肿胀为炎症模型考察B3、B7和B10体内抗炎活性;以小鼠迟发型超敏反应为免疫抑制模型考察体内免疫抑制活性;以佐剂性关节炎大鼠为试验模型考察抗类风湿性关节炎活性作用;以小鼠急性毒性和大鼠长期毒性为试验模型考察安全剂量范围和体内毒性作用。体内药效实验结果显示B3、B7和B10均具有较强的药效活性,且B10活性作用最强;毒性试验结果显示B10的毒性作用最小,优势最明显。故最终确定B10为最优低毒高效部位。本研究最终确定纯化部位B10为雷公藤低毒高效部位,并确定了低毒高效部位的提取纯化工艺,为后续雷公藤低毒高效制剂的研发和质量标准的建立奠定了基础,同时对促进雷公藤制剂的安全用药具有重要意义。
桑文涛,周洪莉,徐锋,王凤,温桃群,曾南[8]（2017）在《药酒抗炎镇痛作用研究现状》文中研究指明药酒是一种传统的中药制剂,是祖国医药的重要组成部分。药酒的临床应用广泛,主要用于治疗类风湿关节炎、肩周炎、膝关节骨性关节炎、强直性脊柱炎等炎症性疾病、坐骨神经痛、腰腿痛、跟痛症以及颈椎病、腰间盘突出症等,疗效明显。现代药理研究表明,药酒具有抗炎、镇痛、抗癌、提高免疫、抗疲劳、延缓衰老、保护肝线粒体结构与功能等作用。回顾现有文献报道,虽然药酒的临床应用广泛,药理研究也日益增多,但主要集中在抗炎、镇痛作用方面。本文就药酒的抗炎、镇痛作用药理实验研究及临床应用现状进行综述,旨在为药酒抗炎、镇痛效应的药理深入研究与临床应用拓展提供一定理论指导。
苏联麟[9]（2017）在《基于UPLC-Q-TOF/MS技术的生、醋五味子抗肝损伤效应物质基础及代谢组学研究》文中认为随着大健康时代的到来,中医药的传承、发展迎来了新的曙光,面临着前所未有的机遇和挑战,毋庸置疑,中药的发展在其中发挥着举足轻重的作用。中药饮片在中医临床用药中发挥的核心作用正日益凸显,但指导其合理应用的中药炮制理论尚缺乏现代科学论据,临床用药混、乱、杂的现象依然存在,已成为制约中医药发展的瓶颈。中药炮制是一门大学问,药材经过炮制改变的不仅仅是成分,还有药效、药性、归经等,依据化学成分含量来定性中药质量不能充分反映其内在品质。本课题以中药五味子为研究对象,从五味子炮制前后物质基础的变化、生醋五味子木脂素类成分在大鼠体内代谢差异以及生醋五味子抗酒精性肝损伤的代谢组学等研究,较为系统深入的对五味子醋制内在机制进行探索,五味子的临床应用提供科学的理论依据。实验研究主要分三个部分:第一部分五味子醋制前后潜在化学标记物的筛选;第二部分为生、醋五味子提取物体内代谢研究;第三部分为生、醋五味子抗酒精性肝损伤作用的代谢组学研究,其中前两部分属于效应物质基础研究范畴。1.五味子醋制前后潜在的差异化学标记物研究 本研究建立了超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）与多元统计分析相结合的方法,迅速地筛选出炮制前后潜在的差异化学成分,即化学标记物。通过与文献或数据库的参考化合物比较质谱、保留时间和/或暂定分配的经验分子式来进行潜在化学标记物的鉴定。这些潜在的化学标记物不仅用于区分中药材和加工炮制品,而且还可能是效应物质基础的中药组成部分。利用上述方法,本研究筛选了五味子醋制前后差异性成分40个,其中生、醋五味子之间显着性差异成分8个（即化学标记物）。鉴定并确认了其中的5个化学成分,分别是5-羟甲基糠醛、五味子甲素及其同分异构体、五味子乙素和五味子酯丁。而其余3个化学标记物通过解析一级、二级质谱信息,推测它们很可能也属于木脂素类成分。其中的五味子乙素和5-羟甲基糠醛具有极显着性差异,被确定为最具代表的化学标记物。综上所述,五味子醋制前后其化学成分的确发生了一系列复杂的变化,尤其是木脂素类成分。因此,推测木脂素类成分为五味子醋制保肝的重要效应物质基础。2.生、醋五味子提取物肝损伤大鼠体内代谢研究 研究表明,五味子醇提取物中主要成分为木脂素,经对照品确认及含量测定的木脂素有五味子甲素（Deoxyschizandrin）、五味子乙素（Schisandrin B）、五味子丙素（Schisandrin C）、五味子醇甲（Schizandrol）、五味子醇乙（Schizandrol B）、五味子酯甲（Schisantherin）、五味子酯乙（Schisantherin B）、五味子酚（Schisanhenol）、戈米辛J（Gomisin J）及戈米辛G（Gomisin G）等,其中前8种木脂素含量较高。近年来,五味子木脂素代谢产物研究多局限于单体成分,提取物给药后体内的代谢研究还未见详尽的报道。近几年,国内外学者对五味子预防酒精性肝损伤的作用的研究较为普遍。大量研究也表明,五味子对急慢性肝损伤有较好的改善效果,因此,本研究选择较为经典、模型复制稳定可靠并受普遍认可的大鼠急性酒精性肝损伤模型作为研究对象。研究中药在体内的代谢产物,可逆向鉴定被吸收或者发生疗效的成分,大大加快有效成分群的确定,促进中药及其炮制品的物质基础与作用机制的揭示。本研究采用UPLC-Q-TOF/MS技术,并利用质量亏损滤过（MDF）方法,实现中药生物样品复杂基质中目标代谢产物的快速寻找,并对生、醋五味子醇提取物中的主要活性成分木脂素在大鼠体内代谢产物进行差异性比较研究。结果表明,木脂素在体内主要发生脱甲氧基、脱亚甲基及氧化反应;与原型化合物相比,相应的代谢产物的保留时间有所缩短,即极性增强。绝大多数木脂素代谢产物在生、醋五味子组的血浆、胆汁、尿液或粪便样品中都有分布,然而醋五味子组的代谢产物除M18外,其余的在胆汁中都有分布且含量较高,而生五味子组近一半的代谢产物未在胆汁中被检出或响应过低。五味子经醋制后的确改变了总木脂素的组成配比,从而导致一些木脂素成分的吸收、分布及代谢差异;醋五味子组的木脂素代谢产物在胆汁及粪便中的分布显着高于生五味子组。木脂素代谢产物在胆汁与粪便中的分布差异,提示其机理可能与“肝肠循环”及肠道菌群有关。通过上述研究,以期为进一步探讨五味子醋制增强保肝效应的物质基础和作用机制提供了重要依据。3.生、醋五味子抗酒精性肝损伤代谢组学研究 肝脏是机体物质代谢的中枢,其代谢转化与吞噬解毒功能对机体有重要保护作用。目前,文献报道的五味子治疗急性酒精性肝损伤（Acute alcoholic liver injury,AALI）作用机制的研究大多数是从药理作用、肝药酶等分子角度进行的。从代谢组学的视角探讨醋制对中药五味子的影响鲜有报道。课题组经前期研究发现,五味子醋制后可以促进大鼠的胆汁分泌,其胆汁排泄总量与生五味子组相比具有显着性差异,本研究以大鼠体内的血浆、胆汁生物样本为研究对象,从整体代谢组学的角度探讨醋五味子对酒精性肝损伤的影响。本研究采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）并运用模式识别的统计学分析方法,研究生、醋五味子进行药物干预后对AALI模型大鼠血浆、胆汁中代谢物组的扰动,挖掘潜在的生物标记物,寻找五味子预防或治疗AALI可能的作用机制,以期阐述五味子醋制后保肝作用增强的科学内涵。采用基于UPLC-Q-TOF/MS的代谢组学技术,并结合主成分分析（PCA）和正交校正的偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）等分析方法筛选、鉴定肝损伤相关的生物标记物。正常对照组、模型组、生五味子及醋五味子组血浆、胆汁代谢物谱得到明显分离,发现并鉴定了血浆中PC、PG、PE、TG、Phytosphingosine、Palmitoyl Serinol 等 21 个差异代谢物;胆汁中 LysoPC（20:4）、PG（18:0/18:1）、12-ketodeoxycholic acid、TG（64:2）等 20 个与肝损伤相关的潜在生物标志物。说明急性酒精性肝损伤大鼠的脂质代谢、胆酸代谢和氨基酸代谢等发生异常。AALI模型大鼠给予生、醋五味子后可使上述标志物代谢水平向正常状态转归,且醋五味子的调节作用强于生五味子（P<0.05）,表明五味子经醋制增强抗肝损伤的作用机制可能与调节上述代谢途径相关。本课题在前期研究工作基础上,采用UPLC-Q-TOF/MS联用技术并结合多元统计分析方法,对中药五味子炮制前后物质基础的改变进行了分析,对五味子生品、醋品在大鼠体内的代谢排泄情况进行了系统的分析研究,并尝试通过代谢组学的方法揭示五味子醋制增强其抗肝损伤作用的内在机制。从化学成分、代谢谱、代谢组学相结合的外源性药物和内源性代谢物的角度共同探讨五味子醋制保肝的作用特点及机制。
刘雪梅[10]（2015）在《基于体内药效毒效雷公藤多苷片谱效关系研究》文中指出目前,上市的雷公藤制剂主要有雷公藤多苷片、雷公藤片、雷公藤总萜片,临床上用于治疗肾病综合征、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病,疗效显着。但其不良反应高发,且不同厂家制剂不良反应和疗效存在较大差异,如何使其临床应用安全有效是目前雷公藤研究的热点及难点。由于雷公藤成分和结构的复杂性,仅对雷公藤内酯醇、雷公藤内酯甲或其它单一成分进行质量控制,难以从根本上解决问题。本课题以此为出发点,拟通过谱效关系的研究寻找到雷公藤低毒高效部位群,为优化制备低毒高效雷公藤制剂的制备工艺及质量评价奠定基础。在前期工作中,本课题组采用高效液相色谱法优化得到用于建立雷公藤制剂指纹图谱的色谱条件,并进行了方法学考察,均符合要求。为后期7个厂家雷公藤制剂高效液相指纹图谱的建立及谱效关系研究提供数据。本课题在此基础上,首先建立了 7个不同厂家雷公藤制剂指纹图谱,选取18个特征峰作为研究对象。其次对不同厂家雷公藤制剂进行了抗炎、免疫抑制药效及毒性的研究。选取二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀为模型,以肿胀度为检测指标进行抗炎药效评价;选取弗氏完全佐剂诱导的佐剂性关节炎为免疫抑制药效学模型,以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）和白介素-1（IL-1）含量为指标,对7厂家雷公藤制剂提取物进行免疫抑制药效学评价;以谷草转氨酶（ALS）、谷丙转氨酶（ALT）和血清尿素氮（BUN）为指标进行肝肾毒性的考察。结果发现,不同指标评价不同厂家雷公藤制剂的抗炎、免疫抑制药效活性存在差异;由毒性评价结果可知,7个厂家的产品对肝肾功能的影响存在差异。由指纹图谱及药效结果分析显示,不同厂家雷公藤制剂作用强弱与雷公藤制剂所含化学成分种类及含量有关。为了考察雷公藤制剂指纹图谱与药效、毒性之间的谱效关系,采用多元线性回归分析中的偏最小二乘法,将指纹图谱中指纹峰的峰面积数据与雷公藤制剂提取物的药效、毒性数据结合进行回归分析,结果显示,18个指纹峰中与抗炎相关的主要药效峰有1、4、8、13、14、16、18号峰;与免疫抑制相关的主要峰:以TNF-α含量为药效指标时,1、2、5、11、12和15号色谱峰贡献较大,以IL-6含量为药效指标时,3、4、6、7、11、12和14号色谱峰贡献较大,以IL-1含量为药效指标时,1、2、9、10、12、17和18号色谱峰贡献较大;与肝功能相关的主要峰有:1、2、5、8、9、10、12、13、14、18号峰;与肾功能相关的主要峰有:1、2、6、10、11、18号峰。综合谱效结果:主要药效峰为3、4、7、15、16、17;主要药效兼毒效峰为:1、2、5、6、8、9、10、13、18号峰;主要药效次毒效峰:11、12、14号峰。
二、雷公藤双层片对急性炎症抗炎作用的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、雷公藤双层片对急性炎症抗炎作用的实验研究（论文提纲范文）
（1）复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及炎症反应的影响（论文提纲范文）
| 中英文缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.祖国医学对蛋白尿的研究 |
| 1.1 古代研究 |
| 1.2 现代研究 |
| 1.3 蛋白尿的治疗 |
| 2.现代医学对炎症反应及蛋白尿的认识 |
| 2.1 现代医学对炎症反应的认识 |
| 2.2 现代医学对蛋白尿的认识 |
| 材料与方法 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 1.4 主要实验仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验环境设置 |
| 2.2 模型建立与实验分组 |
| 2.3 给药灌胃干预 |
| 2.4 取材 |
| 2.5 相关指标检测与步骤 |
| 2.6 统计方法 |
| 结果 |
| 1.大鼠的一般情况 |
| 2.大鼠24h-UPr的变化情况 |
| 3.大鼠生化指标的变化情况 |
| 3.1 大鼠血清Scr与BUN的变化情况 |
| 3.2 大鼠血清TC的变化情况 |
| 3.3 大鼠血浆ALB的变化情况 |
| 3.4 大鼠血清ALT与AST的变化情况 |
| 4.透射电镜结果 |
| 5.免疫组化检测结果 |
| 5.1 肾组织中IL-6的测定 |
| 5.2 肾组织中TGF-β1的测定 |
| 6.荧光定量qPCR检测结果 |
| 讨论 |
| 1.关于肾性蛋白尿模型、实验大鼠、给药途径及给药剂量的选择 |
| 2.关于对照药物的选择 |
| 3.复方青龙衣胶囊的组方、作用及机理分析 |
| 3.1 改善大鼠的一般状态 |
| 3.2 降低24h-UPr |
| 3.3 升高血清ALB,降低血清TC |
| 3.4 减轻肾脏病理损伤 |
| 3.5 降低IL-6、TGF-β1的表达及含量 |
| 4.存在的问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（2）滋肾丸干预糖尿病肾病肾小管上皮细胞焦亡作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 糖尿病肾病炎症机制及中医药干预研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 糖尿病肾病炎症反应的主要参与成分 |
| 3 糖尿病肾病炎症反应的主要信号转导通路 |
| 4 糖尿病肾病炎症反应的中医病机与辨证 |
| 5 中医药干预糖尿病肾病炎症反应的作用及机制 |
| 6 中医药防治糖尿病肾病炎症反应的现代研究方法 |
| 参考文献 |
| 综述二 滋肾丸临床应用及相关研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 滋肾丸的源流与命名 |
| 3 滋肾丸的方证与方义 |
| 4 滋肾丸的制方与化裁 |
| 5 滋肾丸的名家应用经验 |
| 6 滋肾丸的临床应用研究 |
| 7 滋肾丸的现代研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 滋肾丸干预糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞焦亡作用研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 滋肾丸干预高糖培养的人近端肾小管上皮细胞焦亡作用研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验三 滋肾丸治疗糖尿病肾病网络药理学研究 |
| 1 资料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（3）督脉排针法联合通痹灵片治疗强直性脊柱炎的临床研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1.1 强直性脊柱炎的西医研究现状及发展趋势 |
| 1.1.1 定义 |
| 1.1.2 流行病学 |
| 1.1.3 自然病程 |
| 1.1.4 病因及发病机制 |
| 1.1.5 病理变化 |
| 1.1.6 强直性脊柱炎的临床表现 |
| 1.1.7 诊断标准 |
| 1.1.8 活动性评价 |
| 1.1.9 西医治疗 |
| 1.2 中医学对强直性脊柱炎的认识 |
| 1.2.1 病因病机 |
| 1.2.2 现代中医家对强直性脊柱炎的认识 |
| 1.2.3 辨证论治 |
| 1.2.4 中医药疗法 |
| 1.3 督脉排针法联合通痹灵片治疗AS研究依据 |
| 1.3.1 针刺治疗强直性脊柱炎的临床机理研究 |
| 1.3.2 督脉排针刺法的选择依据 |
| 1.3.3 通痹灵片对强直性脊柱炎的作用 |
| 1.3.4 针药结合治疗强直性脊柱炎 |
| 1.4 小结与展望 |
| 第二章 临床研究 |
| 2.1 病例来源 |
| 2.2 病例选择标准 |
| 2.2.1 西医诊断标准 |
| 2.2.2 中医辨证分型标准 |
| 2.2.3 纳入标准 |
| 2.2.4 排除标准 |
| 2.2.5 剔除标准 |
| 2.2.6 脱落标准 |
| 2.3 分组方法 |
| 2.3.1 样本量 |
| 2.3.2 随机化 |
| 2.3.3 对照 |
| 2.3.4 盲法 |
| 2.4 治疗方案 |
| 2.4.1 治疗耗材 |
| 2.4.2 治疗组(督脉排针法联合通痹灵片组) |
| 2.4.3 对照1 组(常规针刺联合通痹灵片组) |
| 2.4.4 对照2 组(督脉排针法组) |
| 2.4.5 对照3 组(通痹灵片组) |
| 2.4.6 疗程 |
| 2.5 异常情况预防方法 |
| 2.6 观察指标 |
| 2.7 观察时间 |
| 2.8 不良事件及处理 |
| 2.8.1 针刺不良事件及处理 |
| 2.8.2 药物不良事件及处理 |
| 2.9 疗效评价标准 |
| 2.10 统计学分析方法 |
| 2.11 临床研究的流程图 |
| 第三章 研究结果与分析 |
| 3.1 研究情况 |
| 3.2 一般资料分析 |
| 3.3 实验室检查指标 |
| 3.3.1 治疗前检查指标基线比较 |
| 3.3.2 血沉 |
| 3.3.3 C反应蛋白 |
| 3.3.4 肿瘤坏死因子-α |
| 3.4 中医证候积分 |
| 3.5 脊柱痛VAS与病人总体评价 |
| 3.5.1 治疗前评分基线比较 |
| 3.5.2 脊柱痛VAS评分 |
| 3.5.3 病人总体评价 |
| 3.6 强直性脊柱炎疾病活动性指数、功能指数、测量学指数 |
| 3.6.1 治疗前评分指数基线比较 |
| 3.6.2 疾病活动性指数 |
| 3.6.3 功能指数 |
| 3.6.4 测量学指数 |
| 3.7 强直性脊柱炎生活质量评价量表 |
| 3.8 临床疗效评价 |
| 3.9 不良反应/事件分析 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 强直性脊柱炎旳病因病机 |
| 4.2 督脉排针法的规律及治疗作用 |
| 4.2.1 督脉排针法学术背景简介 |
| 4.2.2 学术内涵 |
| 4.3 通痹灵片的组方、配伍规律及治疗作用 |
| 4.3.1 通痹灵片的方义 |
| 4.3.2 药对配伍 |
| 4.4 结局指标选择 |
| 4.4.1 实验室检查指标选择 |
| 4.4.2 量表选择 |
| 4.5 结果分析 |
| 4.5.1 实验室检查指标方面 |
| 4.5.2 中医证候积分方面 |
| 4.5.3 脊柱痛VAS与病人总体评价方面 |
| 4.5.4 AS相关量表指标方面 |
| 4.6 结果讨论 |
| 4.7 研究的创新性 |
| 4.8 不足与展望 |
| 4.9 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 附件 |
（4）逍遥散和逍遥散简化方对雷公藤肝毒性解毒作用的比较研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一节 研究概述 |
| 1 雷公藤的研究概述 |
| 2 逍遥散、逍遥散简化方及甘利欣的概述 |
| 2.1 逍遥散的组方意义及保肝作用 |
| 2.2 逍遥散简化方的组方意义 |
| 2.3 甘利欣的保肝作用 |
| 3 血管内皮生长因子信号通路(VEGF信号通路)的概述 |
| 4 研究内容 |
| 第二节 雷公藤肝毒性模型的制备 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药物及试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组及动物给药 |
| 2.2 一般状态观察及体重 |
| 2.3 样本检测 |
| 2.4 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 大鼠的一般情况及体重变化 |
| 3.2 雷公藤不同给药时间的ALT、AST结果 |
| 4 讨论 |
| 第三节 逍遥散和逍遥散简化方对雷公藤肝毒性的解毒作用的比较 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药物及试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 动物给药 |
| 2.3 观察指标 |
| 2.4 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 大鼠的一般情况及体重变化 |
| 3.2 逍遥散和逍遥散简化方对雷公藤肝毒性指标ALT、AST影响的比较 |
| 3.3 逍遥散和逍遥散简化方抗氧化指标SOD、MDA、GSH的比较 |
| 3.4 大鼠肝脏脏器指数 |
| 3.5 肝脏病理切片及损伤程度判断 |
| 4 讨论 |
| 第四节 基于VEGF信号通路研究逍遥散对雷公藤肝毒性的解毒机制 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验药物及试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 动物给药 |
| 2.3 观察指标 |
| 2.4 统计学处理 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 逍遥散和逍遥散简化方对VEGF影响的比较 |
| 3.2 Western Blot测定VEGF、BDNF、p-ERK蛋白表达水平 |
| 3.3 大鼠下丘脑病理切片 |
| 4 讨论 |
| 4.1 探讨逍遥散对雷公藤肝毒性的解毒中医理论基础 |
| 4.2 逍遥散对VEGF通路的影响 |
| 第五节 总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中医药诊治男性不育少弱精子症的研究进展 |
| 1 少弱精子症诱因 |
| 2 中医病名 |
| 3 中医病因病机 |
| 4 中医药治疗 |
| 5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 生精细胞增殖、凋亡相关蛋白及通路的研究进展 |
| 1 精子发生的三个阶段 |
| 2 生精细胞的增殖 |
| 3 生精细胞的凋亡 |
| 4 生精细胞增殖、凋亡相关蛋白 |
| 5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 菟枸助育汤治疗男性不育少弱精子症的临床研究 |
| 前言 |
| 1 研究对象 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 菟丝子-枸杞子对生精功能障碍SD大鼠生精功能的影响 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 基于SCF/c-kit--PI3K--Bcl-2通路探讨菟丝子-枸杞子调控生精细胞增殖与凋亡的作用机制 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（6）基于MyD88依赖性信号通路探讨丁锷教授益气养血通络法治疗类风湿关节炎的作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文索引 |
| 前言 |
| 第一部分 理论探析 |
| 1.RA与 MyD88依赖性信号通路及炎症因子 |
| 1.1 炎症因子在RA发病中起重要调控作用 |
| 1.2 MyD88依赖性信号通路与RA的关节损伤炎症相关 |
| 2.RA的中医病因病机 |
| 3.益气养血通络法治疗RA |
| 第二部分 临床研究 |
| 临床研究一 RA患者MyD88依赖性信号通路的变化及相关性研究 |
| 1.对象和方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 RA组与正常对照组外周血TLR4、MyD88、TAK1、IKK、NF-KBp65的比较 |
| 2.2 RA组与正常对照组血清TNF-α、IL-1β、IL-10的比较 |
| 2.3 RA组与正常对照组血清中实验室指标的比较 |
| 2.4 RA组信号通路相关指标与疾病活动度指标的相关性 |
| 2.5 RA组细胞因子与疾病活动度指标的相关性 |
| 2.6 RA组信号通路与细胞因子的相关性 |
| 2.7 RA组信号通路与中医证候积分的相关性 |
| 2.8 RA组细胞因子与中医证候积分的相关性 |
| 2.9 RA组信号通路与生活质量、焦虑抑郁状况的相关性 |
| 3.结论 |
| 临床研究二 丁锷教授益气养血通络法对RA患者临床疗效、生活质量及MyD88依赖性信号通路的影响 |
| 1.对象与方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 两组治疗前后疗效比较 |
| 2.2 两组治疗前后信号通路相关指标的水平分析比较 |
| 2.3 两组治疗前后TNF-α、IL-1β、IL-10 水平分析比较 |
| 2.4 两组治疗前后实验室指标分析比较 |
| 2.5 两组治疗前后中医证候积分的变化情况 |
| 2.6 两组治疗前后DAS-28及VAS水平的变化情况 |
| 2.7 两组治疗前后生活质量相关指标的影响 |
| 2.8 两组治疗期间病例脱落和副作用发生情况 |
| 3.讨论 |
| 3.1 RA患者MyD88依赖性信号通路的变化及分析 |
| 3.2 RA患者炎症因子的变化及分析 |
| 3.3 RA患者MyD88依赖性信号通路及细胞因子与中医证候的分析 |
| 3.4 益气养血通络法现代药理学研究及药物选择依据 |
| 3.5 益气养血通络法联合雷公藤多苷片治疗RA的临床疗效及其对MyD88依赖性信号通路、细胞因子的影响 |
| 3.6 丁锷教授益气养血通络法联合雷公藤多苷片通过MyD88依赖性信号通路改善类风湿关节炎免疫炎症可能的作用机制 |
| 问题与展望 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 综述:中医药治疗类风湿关节炎的研究进展 |
| 参考文献 |
| 简介 |
| 致谢 |
（7）雷公藤低毒高效部位药效、安全性评价研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 前言 |
| 第一章 雷公藤低毒高效部位体外抗炎及免疫抑制药效研究 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 样品制备 |
| 1.2.2 小鼠脾淋巴细胞的制备 |
| 1.2.3 小鼠脾淋巴细胞增殖实验 |
| 1.2.4 雷公藤纯化部位对LPS刺激小鼠脾淋巴细胞分泌TNF-α和IL-6的影响 |
| 1.2.5 雷公藤纯化部位对Con A刺激小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2的影响 |
| 1.3 统计分析 |
| 1.4 结果 |
| 1.4.1 雷公藤纯化部位(A1-A8、B1-B10)抗炎药效结果 |
| 1.4.2 雷公藤纯化部位(A1-A8、B1-B10)免疫抑制结果 |
| 1.5 讨论与小结 |
| 第二章 雷公藤低毒高效部位体外毒性评价研究 |
| 2.1 仪器与试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 样品制备 |
| 2.2.2 雷公藤纯化部位对H9c2心肌细胞的毒性作用 |
| 2.2.3 雷公藤纯化部位对L-02肝细胞的毒性作用 |
| 2.2.4 雷公藤纯化部位对GNM-SV40肾小球系膜细胞的毒性作用 |
| 2.3 统计分析 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 不同雷公藤纯化部位对H9c2心肌细胞的毒性作用 |
| 2.4.2 不同雷公藤纯化部位对L-02肝细胞的毒性作用 |
| 2.4.3 不同雷公藤纯化部位对GNM-SV40肾小球系膜细胞的毒性作用 |
| 2.5 讨论与小结 |
| 第三章 雷公藤低毒高效部位体内抗炎及免疫抑制药效评价 |
| 3.1 试剂与动物 |
| 3.2 角叉菜胶致大鼠足趾肿胀实验 |
| 3.2.1 动物分组 |
| 3.2.2 给药及测定 |
| 3.3 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验 |
| 3.3.1 动物分组 |
| 3.3.2 给药及测定 |
| 3.4 小鼠迟发型超敏反应实验 |
| 3.4.1 动物分组 |
| 3.4.2 给药及测定 |
| 3.5 统计分析 |
| 3.6 实验结果 |
| 3.6.1 B3、B7和B10对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响 |
| 3.6.2 B3、B7和B10对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响 |
| 3.6.3 B3、B7和B10对小鼠迟发型超敏反应所致耳肿胀的影响 |
| 3.7 讨论与小结 |
| 第四章 雷公藤低毒高效部位抗类风湿性关节炎活性研究 |
| 4.1 仪器与材料 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 动物分组 |
| 4.2.2 佐剂性关节炎大鼠模型的诱导和评价 |
| 4.2.3 血清中炎症因子含量测定 |
| 4.2.4 免疫器官指数 |
| 4.3 统计分析 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 B3、B7和B10对佐剂性关节炎大鼠足趾肿胀度的影响 |
| 4.4.2 B3、B7和B10对关节炎大鼠胸腺指数和脾脏指数的影响 |
| 4.4.3 B3、B7和B10对关节炎大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和PGE-2分泌的影响 |
| 4.4.4 B3、B7和B10对关节炎大鼠踝关节病理学变化 |
| 4.5 讨论与小结 |
| 第五章 雷公藤低毒高效部位急性毒性及长期毒性研究 |
| 5.1 动物与试药 |
| 5.2 急性毒性实验 |
| 5.2.1 急毒实验预实验 |
| 5.2.2 急毒实验 |
| 5.3 长期毒性实验方法 |
| 5.3.1 动物分组及给药 |
| 5.3.2 观察指标 |
| 5.3.3 血液生化学检查 |
| 5.3.4 系统解剖 |
| 5.3.5 脏器系数 |
| 5.3.6 病理组织学检查 |
| 5.4 统计分析 |
| 5.5 实验结果 |
| 5.5.1 急毒实验结果 |
| 5.5.2 长期毒性实验结果 |
| 5.5.2.1 对体重变化的影响 |
| 5.5.2.2 对生化指标的影响 |
| 5.5.2.3 对脏器系数的影响 |
| 5.5.2.4 雷公藤纯化部位对主要脏器的影响 |
| 5.6 讨论与小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（8）药酒抗炎镇痛作用研究现状（论文提纲范文）
| 1 药酒概述 |
| 2 药酒抗炎作用研究 |
| 2.1 药酒抗炎作用的现代药理研究 |
| 2.2 药酒抗炎作用的临床应用 |
| 2.2.1 类风湿性关节炎 |
| 2.2.2 肩周炎 |
| 2.2.3 强直性脊柱炎 |
| 2.2.4 膝骨性关节炎 |
| 2.2.5 其他炎症性疾病 |
| 3 药酒镇痛作用研究 |
| 3.1 药酒镇痛作用的现代药理研究 |
| 3.2 药酒镇痛作用的临床应用 |
| 3.2.1 坐骨神经痛 |
| 3.2.2 肩痛 |
| 3.2.3 腰腿痛 |
| 3.2.4跟痛症 |
| 4 药酒应用注意事项 |
| 5 结语 |
（9）基于UPLC-Q-TOF/MS技术的生、醋五味子抗肝损伤效应物质基础及代谢组学研究（论文提纲范文）
| 符号&缩略语 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 1 五味子炮制研究进展 |
| 1.1 炮制历史沿革 |
| 1.2 现代炮制研究 |
| 2 五味子化学成分研究进展 |
| 2.1 木脂素类 |
| 2.2 多糖类 |
| 2.3 挥发油类 |
| 2.4 其他成分 |
| 3 五味子药理研究进展 |
| 3.1 对肝脏的作用 |
| 3.2 对心血管系统的作用 |
| 3.3 对免疫系统的影响 |
| 3.4 抗氧化和抗衰老的作用 |
| 4 酒精性肝损伤的研究进展 |
| 4.1 酒精性肝损伤的发病机制 |
| 4.1.1 乙醇及其代谢产物乙醛所致肝损伤 |
| 4.1.2 氧化应激反应与脂质过氧化 |
| 4.1.3 内毒素及炎症因子的浸润 |
| 4.1.4 氧化还原免疫系统的改变 |
| 4.2 五味子干预酒精性肝损伤的研究现状 |
| 5 代谢组学及其在中药中的研究进展 |
| 5.1 代谢组学的基本概念和特点 |
| 5.2 色谱-质谱联用技术在代谢组学中的应用 |
| 5.2.1 气相色谱-质谱联用(GC-MS) |
| 5.2.2 液相色谱-质谱联用(LC-MS) |
| 5.3 代谢组学数据分析与处理研究进展 |
| 5.3.1 数据预处理 |
| 5.3.2 模式识别 |
| 5.3.3 代谢组学数据库 |
| 5.3.4 代谢组学数据处理软件 |
| 5.4 代谢组学在中药研究中的应用 |
| 5.4.1 中药质量控制研究 |
| 5.4.2 中药安全性和毒性评价研究 |
| 5.4.3 中药药物代谢组学研究 |
| 5.5 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 第一章 五味子醋制前后潜在差异化学标记物研究 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 材料与试剂 |
| 2.2 样品制备 |
| 2.2.1 生、醋五味子炮制品的制备 |
| 2.2.2 生、醋五味子供试品的制备 |
| 2.2.3 混合对照品的制备 |
| 2.3 色谱条件 |
| 2.4 质谱条件 |
| 2.5 五味子化学成分自建数据库 |
| 2.6 多元统计分析 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 多元统计分析与特征标记物筛选 |
| 3.2 化学标记物的分析鉴定 |
| 4 小结 |
| 第二章 生、醋五味子提取物肝损伤大鼠体内代谢研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 仪器、试剂与药材 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 色谱检测条件 |
| 1.4 质谱检测条件 |
| 1.5 样品制备 |
| 1.5.1 生、醋五味子提取物及给药样品制备 |
| 1.5.2 对照品溶液的制备 |
| 1.5.3 生物样品的采集与供试液的制备 |
| 1.5.4 大鼠血浆样品供试液的制备 |
| 1.5.5 大鼠尿液、粪便、胆汁样品供试液的制备 |
| 1.6 数据采集 |
| 2 结果与讨论 |
| 2.1 肝脏病理模型分析 |
| 2.2 大鼠血浆、尿液、粪便、胆汁UPLC-Q-TOF/MS分析 |
| 2.3 PeakView数据处理与分析 |
| 2.3.1 木脂素原型成分的结构鉴定 |
| 2.3.2 木脂素代谢产物的解析 |
| 3 小结与讨论 |
| 第三章 生、醋五味子抗酒精性肝损伤代谢组学研究 |
| 第一节 五味子抗急性酒精性肝损伤的药理学验证 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验动物 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 给药样品溶液的制备 |
| 3.2 大鼠急性酒精性肝损伤模型的制备和药物干预 |
| 3.3 动物的处理 |
| 3.4 大鼠血清的制备 |
| 3.5 10%肝匀浆的制备 |
| 3.6 观察指标及方法 |
| 3.6.1 动物一般情况 |
| 3.6.2 肝脏形态学观察 |
| 3.6.3 肝脏HE染色、诊断标准和结果判定 |
| 3.7 肝功能指标的测定 |
| 4 结果与讨论 |
| 4.1 大鼠外在观察 |
| 4.2 肝脏的形态及病理学观察 |
| 4.2.1 肝脏形态学观察 |
| 4.2.2 肝脏病理学变化观察及评分结果 |
| 4.3 各组大鼠肝功能的变化情况 |
| 4.3.1 大鼠血清AST、ALT、AKP、GGT的活力变化 |
| 4.3.2 肝组织ALT、AST、AKP的酶活力变化 |
| 第二节 五味子抗急性酒精性肝损伤代谢组学研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 方法 |
| 2.1 生、醋五味子饮片及提取液的制备 |
| 2.2 分组与给药 |
| 2.3 大鼠血浆、胆汁的采集 |
| 2.4 样品前处理 |
| 2.5 UPLC-Q-TOF/MS分析 |
| 2.5.1 色谱条件 |
| 2.5.2 Q-TOF/MS质谱条件 |
| 2.5.3 数据分析 |
| 3 实验方法的选择与优化 |
| 3.1 样品的前处理 |
| 3.2 分析条件的选择和优化 |
| 3.3 数据处理方法的选择和优化 |
| 3.3.1 分析系统稳定性评价 |
| 3.3.2 差异化合物分子特征提取 |
| 3.4 差异代谢物的鉴定 |
| 4 结果与讨论 |
| 4.1 五味子抗酒精性肝损伤血浆代谢组学研究 |
| 4.1.1 血浆样品总离子流图(TIC)分析 |
| 4.1.2 模式识别与判别分析 |
| 4.1.3 生、醋五味子血浆代谢物组间差异代谢物的鉴定 |
| 4.1.4 血浆代谢物代谢通路分析 |
| 4.1.4.1 磷脂代谢 |
| 4.1.4.2 鞘脂代谢 |
| 4.2 五味子抗肝损伤胆汁代谢组学研究 |
| 4.2.1 胆汁样品总离子流图(TIC)分析 |
| 4.2.2 模式识别与判别分析 |
| 4.2.3 生、醋五味子胆汁代谢物组间差异代谢物的鉴定 |
| 4.2.4 胆汁代谢物代谢通路分析 |
| 4.3 血浆、胆汁差异代谢物及相关代谢通路综合分析 |
| 4.3.1 胆酸内分泌与脂代谢 |
| 4.3.2 花生四烯酸与甘油磷脂代谢通路 |
| 4.3.3 ROS与CYP450酶 |
| 4.3.4 PI3K/AKT/mTOR信号通路 |
| 5 小结与讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 1 总结与讨论 |
| 1.1 五味子相关文献研究 |
| 1.2 五味子醋制前后潜在化学标记物研究 |
| 1.3 生、醋五味子醇提取物肝损伤大鼠体内代谢研究 |
| 1.4 五味子抗酒精性肝损伤代谢组学研究 |
| 2 创新点 |
| 3 展望 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（10）基于体内药效毒效雷公藤多苷片谱效关系研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 不同厂家雷公藤多苷片指纹图谱的建立 |
| 1. 仪器与试药 |
| 2. 色谱条件 |
| 3. 供试品溶液的制备 |
| 4. 指纹图谱的建立 |
| 5. 讨论与小结 |
| 第二章 雷公藤多苷片抗炎谱效关系研究 |
| 1. 二甲苯致小鼠耳肿胀实验 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 主要试剂配制 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 实验结果 |
| 2. 角叉菜胶致大鼠足肿胀实验 |
| 2.1 仪器与试药 |
| 2.2 实验动物 |
| 2.3 主要试剂的配制 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.5 指标测定 |
| 2.6 实验结果 |
| 3. 抗炎谱效关系研究 |
| 3.1 偏最小二乘法 |
| 3.2 相关分析结果 |
| 4. 讨论与结果 |
| 第三章 雷公藤多苷片免疫抑制谱效关系研究 |
| 1. 免疫抑制实验 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 主要试剂的配制 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 实验结果 |
| 2. 免疫抑制谱效关系研究 |
| 2.1 雷公藤制剂HPLC指纹图谱与TNF-α的相关分析 |
| 2.2 雷公藤制剂HPLC指纹图谱与IL-6含量的谱效分析 |
| 2.3 雷公藤制剂HPLC指纹图谱与IL-1含量的谱效分析 |
| 3. 讨论与结果 |
| 第四章 雷公藤多苷片毒性谱效关系研究 |
| 1. 肝肾毒性实验 |
| 1.1 仪器与试药 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 肝肾毒性实验 |
| 1.4 实验结果 |
| 2. 毒性谱效关系研究 |
| 2.1 雷公藤制剂HPLC指纹图谱与ALT、AST值的相关分析 |
| 2.2 雷公藤制剂HPLC指纹图谱与BUN值的相关分析 |
| 3. 讨论与小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
四、雷公藤双层片对急性炎症抗炎作用的实验研究（论文参考文献）
- [1]复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及炎症反应的影响[D]. 王媛媛. 黑龙江省中医药科学院, 2021(02)
- [2]滋肾丸干预糖尿病肾病肾小管上皮细胞焦亡作用及机制研究[D]. 郭晓媛. 北京中医药大学, 2021(01)
- [3]督脉排针法联合通痹灵片治疗强直性脊柱炎的临床研究[D]. 赖德培（Thanakorn Theerakarunwong）. 广州中医药大学, 2020(09)
- [4]逍遥散和逍遥散简化方对雷公藤肝毒性解毒作用的比较研究[D]. 原文娜. 山西中医药大学, 2020(07)
- [5]补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究[D]. 管斯琪. 北京中医药大学, 2020(04)
- [6]基于MyD88依赖性信号通路探讨丁锷教授益气养血通络法治疗类风湿关节炎的作用机制[D]. 刘林. 安徽中医药大学, 2019(02)
- [7]雷公藤低毒高效部位药效、安全性评价研究[D]. 杨海跃. 厦门大学, 2018(07)
- [8]药酒抗炎镇痛作用研究现状[J]. 桑文涛,周洪莉,徐锋,王凤,温桃群,曾南. 中成药, 2017(07)
- [9]基于UPLC-Q-TOF/MS技术的生、醋五味子抗肝损伤效应物质基础及代谢组学研究[D]. 苏联麟. 南京中医药大学, 2017(01)
- [10]基于体内药效毒效雷公藤多苷片谱效关系研究[D]. 刘雪梅. 福建中医药大学, 2015(01)