金标准抗人IgG4单克隆抗体浸渍试验诊断脑囊尾蚴病及疗效评价研究

金标准抗人IgG4单克隆抗体浸渍试验诊断脑囊尾蚴病及疗效评价研究

一、金标抗人IgG4单抗浸测试验对脑囊虫病诊断与疗效评价的研究(论文文献综述)

李瑾,王燕,魏庆宽,贾凤菊,肖婷,孙慧,于振华,黄炳成[1](2017)在《抗猪囊尾蚴IgG4抗体的特异性抗原筛选》文中提出将囊液抗原蛋白采用双向凝胶电泳分离,经考马斯亮蓝染色后用双向电泳图像分析软件分析蛋白点,以脑囊尾蚴病患者血清为一抗进行蛋白质印迹分析(Western blotting),选取阳性蛋白点进行质谱分析,获取肽质量指纹图谱,采用Mascot软件在NCBI中搜寻、比对,筛选出抗猪囊尾蚴IgG4特异性抗原。囊液抗原经双向电泳检测到(201±5)个蛋白斑点,相对分子质量(Mr)为10 000170 000,等电点(pI)为3.010.0。Western blotting分析显示,与患者血清中特异IgG4抗体结合的抗原以小分子量蛋白为主,从中筛选出51个(抗原)点进行质谱分析,其中有21个点峰值大于39。对比分析显示,高峰值点与10种囊尾蚴蛋白有关,其中最为密切相关的为4种蛋白,按分值高低排序分别为Ts8B2、Ts8B3、10ku抗原和Sequence 3。

张静,郝艳秋[2](2016)在《儿童慢性复发性脑囊虫病诊治新进展》文中提出脑囊虫病是中枢神经系统最常见的寄生虫病,是流行地区继发性癫痫的主要病因。儿童脑囊虫病较成人脑囊虫病临床表现更为复杂多样,诊疗难度也更大,儿童慢性复发性脑囊虫病在临床上少见报道。本文通过复习文献资料,就儿童慢性复发性脑囊虫病临床特征、诊断方法及治疗情况进行综述。

韩彦明,张新定,赵雪灵,田春兰[3](2011)在《循环抗原和特异性IgG4对脑囊尾蚴病诊断和疗效评估价值比较》文中提出目的比较循环抗原(circulating antigen,CAg)和特异性IgG4在脑囊尾蚴病诊断和生存状态、疗效评估中的价值。方法依据CT和MRI的影像表现将68例脑囊尾蚴病患者分为活虫期、变性死亡早期、变性死亡后期及钙化期四个病期组,检测各病期患者血清中囊虫CAg和IgG4;分别对38例活虫期患者治疗前,治疗中,治疗后血清中CAg和特异性IgG4进行检测和比较分析。结果不同病期患者血清CAg阳性率、IgG4阳性率差异均有显着意义。38例活虫期患者血清CAg、IgG4阳性率分别为100%和98%,随疗程进展,CAg、IgG4阳性率逐渐降低,不同疗程间CAg阳性率差别有显着性意义,而IgG4阳性率差异无统计学意义。结论 CAg和特异性IgG4能较客观地反映人体内脑囊尾蚴的生存状态,可作为早期诊断指标,两者的特异性及敏感性无显着差异;对远期疗效评估可以优先选用CAg。

宇芙蓉[4](2011)在《抗猪囊尾蚴特异性卵黄抗体的制备与鉴定及其诊断猪囊尾蚴病作用研究》文中进行了进一步梳理目的猪囊尾蚴病是由猪带绦虫的幼虫寄生中间宿主而引起的一种重要的人畜共患寄生虫病,是我国重点防治的寄生虫病之一。它不仅严重地危害着广大人民群众的健康,也给畜牧业生产造成极大的损失。加强猪囊尾蚴病的诊断研究对其防治具有重要意义。本课题利用从猪囊尾蚴cDNA文库中扩增出来的cC1基因,克隆至原核表达载体,利用所得的重组蛋白,免疫25w产蛋海兰母鸡,制备抗猪囊尾蚴特异性鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)并鉴定。动态监测IgY效价,大量纯化效价较高阶段的IgY,通过间接ELISA试验和Dot-ELISA试验探讨cC1蛋白和IgY用于诊断猪囊尾蚴病的价值,为猪囊尾蚴病的免疫学诊断提供一种新的方法。方法重组质粒pET28a-cC1阳性重组子转化宿主菌E.coli BL21,提质粒,双酶切鉴定(BamH I、Xhol I)阳性克隆,并送上海生工生物工程技术服务有限公司测序鉴定,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定,纯化cC1蛋白。购买未经免疫的海兰母鸡雏鸡,养至25W产蛋。每只母鸡以200μg/只进行皮下加肌肉多点注射免疫,共免疫4次,首次免疫后28d进行加强免疫3次,每次间隔时间为10d。收集免疫前、后鸡蛋,标记后4℃保存备用。水稀释法粗提抗猪囊尾蚴IgY抗体,盐析法纯化抗体,SDS-PAGE和Western-blotting进行鉴定。间接ELISA法测定抗体效价,选取效价最高时间段的鸡蛋,EGGstractTM IgY Purification System纯化试剂盒大量提取纯化IgY抗体4℃保存备用。利用cC1蛋白与111份患者血清(正常人血清30例,猪囊尾蚴感染者血清20例,血吸虫感染者血清30例,钩虫感染者血清16例,华支睾吸虫感染者血清15例)反应,进行敏感性、特异性和交叉反应性分析,检测重组抗原活性;同时利用制备的抗猪囊尾蚴IgY抗体与111份患者血清(猪囊尾蚴感染者血清20例,正常人血清30例,血吸虫感染者血清30例,钩虫感染者血清16例,华支睾吸虫感染者血清15例)反应,进行敏感性、特异性和交叉反应性分析,观察制备的抗猪囊尾蚴IgY抗体用作诊断试剂的潜能。结果重组质粒pET28a-cC1限制性内切酶双酶切鉴定与目的基因大小(1056bp)相符,同时测序结果证实重组表达质粒pET28a-cC1构建成功。Lowry法测定制备的纯化的重组cC1蛋白浓度为3.5g/l,相对分子量约40ku。免疫海兰母鸡后,间接ELISA法测定抗体效价,初次免疫后5d左右产生抗体,随着时间推移,抗体滴度逐渐上升,至免疫后55d达到最高峰,效价达到1:105以上。不同产蛋母鸡之间抗体滴度存在个体差异。用EGG stractTM IgY Purification System纯化试剂盒大量纯化IgY,经考马斯亮蓝测定试剂盒测得的IgY浓度为4.96 g/l。SDS-PAGE检测IgY分子量与理论值一致。Western-blotting显示,免疫后的IgY与cC1蛋白可以相互识别,而免疫前的鸡蛋的抗体提取物则不能识别cC1蛋白。以cC1包板,成功建立间接ELISA体系,检测20例猪囊尾蚴病患者血清中抗体,敏感性为85%,特异性为92.20%;假阳性率为15% ;假阴性率为7.8%;阳性预测值为68%;阴性预测值为96.5 %;Youden指数为0.772(真实性较好),总一致率90.1%;期望一致率:Pe为67.57%;Kappa值: K = 0.6947(一致性好);阳性似然比9.67%;阴性似然比0.16;初步实验表明用cC1诊断猪囊尾蚴血清中抗体有着较为满意的结果。Dot-ELISA检测20例猪囊尾蚴病患者血清中循环抗原,敏感性为95%,特异性为98.9%,假阳性率为5%,假阴性率为1.1% ,阳性预测值为95%,阴性预测值为98.9%,Youden指数:YI为0.939(真实性很好),总一致率P0为98.2%,期望一致率Pe为70.46%,Kappa值为0.939,一致性好;与华支睾吸虫病患者血清、血吸虫病患者血清及钩虫虫病患者血清无交叉反应。结论本研究成功大量制备了抗猪囊尾蚴特异性IgY抗体,具有良好的安全性和稳定性,易于保存。成功建立间接ELISA体系和Dot-ELISA体系,分别用于猪囊尾蚴病人血清中抗体和循环抗原的检测,初步试验表明,有较为满意的结果,有望为猪囊尾蚴病诊断提供了新的试剂。

高鹏,崔爱环,李金德[5](2010)在《60例脑囊虫病治疗效果及免疫检测分析》文中研究表明目的探讨脑囊虫病的治疗效果和免疫学检查的价值。方法将60例脑囊虫病患者随机分为两组,分别给予吡喹酮与丙硫咪唑治疗,并在治疗前后进行免疫学检查。结果吡喹酮治疗组和丙硫咪唑治疗组总有效率分别为83.33%和80.0%,差异无统计学意义(P>0.05);不良反应发生率吡喹酮组为70.00%,丙硫咪唑组为23.33%,差异有统计学意义(P<0.01)。60例脑囊虫病患者治疗前后血清、脑脊液IHA阳性率分别为88.33%和85.00%、58.33%和53.33%,ELISA阳性率分别为93.33%和88.33%、63.33%和58.33%,差异均无统计学意义(P>0.05);IgG4阳性率分别为76.67%和18.33%、51.67%和13.33%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论吡喹酮和丙硫咪唑治疗脑囊虫病疗效相当,但丙硫咪唑的不良反应发生率低。脑脊液囊虫免疫学检查阳性率较血清低,血清特异IgG4检查对脑囊虫病的诊断和疗效评价具有一定的参考价值。

郑晓燕,谷俊朝[6](2009)在《囊尾蚴病诊治研究进展》文中研究指明囊尾蚴病是一种常见的人兽共患病,临床表现多样,常导致误诊。本文对该病的病原学、流行病学、临床表现、免疫学诊断及治疗药物等方面进行综述,希望为该病的临床诊治提供参考。

马安,王越,郭建勋,方文,干小仙[7](2009)在《特异性IgG4金标快速检测法在囊虫病诊断中的应用》文中研究说明目的创建简易、快速、敏感的囊虫IgG4检测方法,研制一种快速准确的囊虫病诊断试剂。方法以猪囊尾蚴囊液粗提液为检测用抗原,以胶体金标记抗人IgG4单克隆抗体为检测探针,采用自行设计的垂直流渗滤装置检测人血清中囊虫特异性IgG4抗体,平行检测IgG进行比较分析,并以囊虫IgG4ELISA检测试剂为对照,评价其诊断价值。结果用金标渗滤法检测人血清中囊虫特异性IgG4的敏感性和特异性分别为95.7%(90/94)、100.0%(50/50),与IgG检测结果相近;与包虫病患者、裂头蚴病患者血清的交叉反应率分别为8.0%(4/25)、8.3%(4/24),低于IgG检测;未发现与肺吸虫病、血吸虫病患者血清有交叉反应。金标渗滤法快速检测囊虫IgG4在敏感性和特异性上略高于ELISA检测试剂,经X2检验差异无统计学意义(X2=2.77,P>0.05)。结论金标渗滤法快速检测囊虫特异性IgG4,不仅操作简便、快速,而且敏感性高、特异性强,特别适合临床检测和现场查病,值得进一步开发应用。

杨艳君,吴晓燕,杨树芳,贾凤菊,时法茂,魏艳彬[8](2008)在《四种免疫学检查在脑囊虫病诊断和治疗中的应用》文中进行了进一步梳理目的探讨4种免疫学检查在脑囊虫病诊治中的应用价值及临床意义。方法对确诊的脑囊虫病病人治疗前后血清及脑脊液进行间接血凝试验(IHA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、囊虫循环抗原(CAg)以及短程抗体(IgG4)检测,并对其检测结果进行分析比较。结果治疗前脑囊虫病人血清IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是68.28%、65.19%、51.54%和63.84%。脑脊液IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是30.68%、39.98%、46.03%和41.94%。治疗后血清IHA、ELISA、CAg、IgG4阳性率分别是67.40%、65.63%、12.33%和11.89%。结论血清及脑脊液IHA、ELISA检测囊虫循环抗原(CAg)以及短程抗体(IgG4),对囊虫病诊断方面均有一定的敏感性,但因抗体可持续数年,因此IHA、ELISA不能作为疗效考核的指标。囊虫循环抗原(CAg)检测以及短程抗体(IgG4)检测可作为疗效考核的指标。

田子玉,蔡亚男,蔡红梅,高明,王巍巍,赵权[9](2008)在《囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展》文中研究指明由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。

黄丽[10](2007)在《猪囊尾蚴cDNA文库的免疫学筛选及基因的克隆、表达及鉴定》文中进行了进一步梳理目的:从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选免疫学阳性的编码基因,克隆、表达并进行鉴定,为临床猪囊尾蚴患者的免疫学诊断提供特异的重组抗原。方法:经确诊脑囊尾蚴病人血清免疫学筛选猪囊尾蚴cDNA文库,阳性克隆经PCR技术扩增噬菌体载体中插入的DNA片段,并将其克隆入pMD-18T载体中,测序结果与应用EXPASY软件进行分析,获得完整开放阅读框(ORF)基因序列,设计并合成引物PCR法扩增,与T载体连接,转化入XL1-blue大肠杆菌,双酶切鉴定;再将其亚克隆入表达载体pET-28a(+),转化入BL21大肠杆菌,双酶切、测序鉴定后,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blot方法观察表达结果。结果:经cDNA文库筛选,初步确定NC膜上深黄色单个噬菌斑为阳性克隆;用上下游载体臂上通用引物PCR法扩增出了200~1800bp不同大小的DNA片断;将其克隆入PMD-18T载体,测序结果应用EXPASY软件分析,获得一个681bpORF DNA序列;PubMed中blast程序确定为一个新基因(命名为Ts1),录入号为EU009656;PCR法扩增出了一个681bp左右的DNA片断,将重组质粒pMD-18T-Ts1、pET-28a(+)-Ts1分别作BamHⅠ和HindⅢ双酶切,均能得到一个大小与PCR扩增产物一致的插入片断,对插入片断的测序结果表明,Ts1具有一个长度为681bp的ORF,编码227个氨基酸,理论分子量25.86kDa,理论等电点(pI)为6.68;用IPTG诱导重组质粒pET-28a(+)-Ts1,产物行SDS-PAGE,可得到一分子量约28.0kDa融合蛋白,Western-blot法鉴定该蛋白能被脑囊尾蚴病人血清所识别。结论:本试验成功地筛选、克隆和表达了猪囊尾蚴Ts1基因,所获得的目的蛋白有望成为猪囊尾蚴病诊断抗原,其免疫学诊断价值值得进一步研究。

二、金标抗人IgG4单抗浸测试验对脑囊虫病诊断与疗效评价的研究(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、金标抗人IgG4单抗浸测试验对脑囊虫病诊断与疗效评价的研究(论文提纲范文)

(1)抗猪囊尾蚴IgG4抗体的特异性抗原筛选(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 囊液抗原和脑囊尾蚴病患者血清来源
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 囊液蛋白的纯化与测定
    1.4 囊液抗原双向电泳分析
    1.5 Western blotting分析
    1.6 质谱分析
2 结果
    2.1 囊液抗原双向电泳结果
    2.2 目的蛋白斑点筛选结果
    2.3 质谱鉴定结果
3讨论

(2)儿童慢性复发性脑囊虫病诊治新进展(论文提纲范文)

1 临床表现
2 诊断方法
    2.1 影像学检查
    2.2 实验室检查
        2.2.1 免疫学方法
        2.2.2 脑脊液细胞学检查
        2.2.3 淋巴细胞转换试验(LTT)
        2.2.4 MTT淋巴细胞增殖实验
        2.2.5 基因检测技术
    2.3 脑电图方法
3 治疗方法
    3.1 驱虫治疗
    3.2 激素治疗
    3.3 抗癫痫药物
    3.4 外科手术治疗
4 展望

(4)抗猪囊尾蚴特异性卵黄抗体的制备与鉴定及其诊断猪囊尾蚴病作用研究(论文提纲范文)

中英文词汇对照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料与方法
    实验材料
    实验方法
结果
讨论
结论
参考文献
附录一 (个人简历)
附录二(致谢)
综述
    参考文献

(5)60例脑囊虫病治疗效果及免疫检测分析(论文提纲范文)

资料与方法
    1 一般资料
    2 免疫学检查
    3 治疗
    4 疗效评价标准
    5 统计学方法
结 果
    1 疗效
    2 免疫学检测
讨 论

(6)囊尾蚴病诊治研究进展(论文提纲范文)

1 病原学
2 流行病学
    2.1 流行范围囊尾蚴病危害严重、分布广泛, 在墨西哥、中南美洲、非洲、亚洲均有流行, 是一种全球范围内流行的寄生虫病[6]。
    2.2 传染源猪带绦虫病患者是囊尾蚴病的唯一传染源。患者粪便排出的虫卵对自身和周围人群均具有传染性。
    2.3 传播途径
    2.4 易感人群不同性别和年龄人群均易感, 以21~40年龄段为主, 农民居多, 近年来儿童和城市居民患病率也有所增加。
3 临床表现
    3.1 皮下及肌肉囊尾蚴病皮下结节数可从1个至数千个不
    3.2 脑囊尾蚴病
    3.3 眼囊尾蚴病
4 免疫学检查
    4.1 免疫检测指标
        4.1.1 抗体检测
        4.1.2 抗原检测
        4.1.3 循环免疫复合物检测
    4.2 免疫诊断检测方法
        4.2.1 酶联免疫吸附试验 (ELISA)
        4.2.2 斑点酶联免疫吸附试验 (Dot-ELISA)
        4.2.3 单克隆抗体酶联免疫吸附试验 (Mc Ab-ELISA)
        4.2.4 酶联免疫电转移印记技术 (EITB) EITB把十二烷基硫酸
        4.2.5 胶体金免疫层析技术 (GICA)
        4.2.6 金标抗人Ig G4单抗浸测试验
        4.2.7 斑点金免疫渗滤法 (DIGFA)
5 治疗
    5.1 吡喹酮 (Praziquantel)
    5.2 阿苯达唑 (Albendazol)
    5.3 阿苯达唑和吡喹酮联合疗法
    5.4 甲氧哒唑

(8)四种免疫学检查在脑囊虫病诊断和治疗中的应用(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 临床资料
    1.2 方法
2 结果
    2.1 治疗前囊虫免疫学检查结果
    2.2 治疗后囊虫免疫学检查结果
3 讨论

(9)囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展(论文提纲范文)

1 囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展
    1.1 免疫学检测方法
        1.1.1 酶联免疫吸附法(ELISA)
        1.1.2 斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)
        1.1.3 生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELI-SA)
        1.1.4 单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)
        1.1.5 酶联免疫印渍技术(ELIB)
2 基因检测技术
    2.1 DIG标记DNA探针
    2.2 细胞因子基因检测方法
    2.3 基因重组技术
3 免疫试剂盒的应用
    3.1 循环抗原酶联免疫试剂盒
    3.2 猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒
4 小结

(10)猪囊尾蚴cDNA文库的免疫学筛选及基因的克隆、表达及鉴定(论文提纲范文)

中英文词对照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料与方法
    实验材料
    方法
结果
讨论
参考文献
附录
    一、个人简历
    二、教育背景
    三、获奖情况
    四、发表论文(均为第一作者)
致谢
综述
    参考文献

四、金标抗人IgG4单抗浸测试验对脑囊虫病诊断与疗效评价的研究(论文参考文献)

  • [1]抗猪囊尾蚴IgG4抗体的特异性抗原筛选[J]. 李瑾,王燕,魏庆宽,贾凤菊,肖婷,孙慧,于振华,黄炳成. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2017(05)
  • [2]儿童慢性复发性脑囊虫病诊治新进展[J]. 张静,郝艳秋. 中国优生与遗传杂志, 2016(01)
  • [3]循环抗原和特异性IgG4对脑囊尾蚴病诊断和疗效评估价值比较[J]. 韩彦明,张新定,赵雪灵,田春兰. 中国人兽共患病学报, 2011(04)
  • [4]抗猪囊尾蚴特异性卵黄抗体的制备与鉴定及其诊断猪囊尾蚴病作用研究[D]. 宇芙蓉. 安徽医科大学, 2011(11)
  • [5]60例脑囊虫病治疗效果及免疫检测分析[J]. 高鹏,崔爱环,李金德. 中国病原生物学杂志, 2010(09)
  • [6]囊尾蚴病诊治研究进展[J]. 郑晓燕,谷俊朝. 中国热带医学, 2009(11)
  • [7]特异性IgG4金标快速检测法在囊虫病诊断中的应用[J]. 马安,王越,郭建勋,方文,干小仙. 国际流行病学传染病学杂志, 2009(02)
  • [8]四种免疫学检查在脑囊虫病诊断和治疗中的应用[J]. 杨艳君,吴晓燕,杨树芳,贾凤菊,时法茂,魏艳彬. 中国热带医学, 2008(07)
  • [9]囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展[J]. 田子玉,蔡亚男,蔡红梅,高明,王巍巍,赵权. 吉林畜牧兽医, 2008(01)
  • [10]猪囊尾蚴cDNA文库的免疫学筛选及基因的克隆、表达及鉴定[D]. 黄丽. 安徽医科大学, 2007(05)

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金标准抗人IgG4单克隆抗体浸渍试验诊断脑囊尾蚴病及疗效评价研究
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